乙肝病毒cccDNA的研究进展-SYM.PDFVIP

国外医学病毒学分册 2005 年 12 月第 12 卷第 6 期　Section Virology Foreign Med Sci , December 2005 ,Vol 12 , No. 6 1·61 · · · 综述 乙肝病毒cccDNA 的研究进展 张涛 高英堂 韩涛 【摘要】　共价闭合环状 DNA (cccDNA) 是 HBV 的原始复制模板 ,对乙肝病毒的复制及感染状态 的建立具有重要意义。本文旨在对近年来有关 cccDNA 的常用检测方法、不同标本的检测及其临床 意义等方面的进展作一综述报道。 【关键词】　cccDNA ; rcDNA ; 乙型肝炎病毒 ( ) 　　乙型肝炎病毒 HBV 属于嗜肝 DNA 病毒家 HBV rcDNA 。新合成的HBV rcDNA 一方面进入细 族 ,其基因组是双链松弛环状 DNA ( relaxed circu 胞核内 ,转化为新的 cccDNA ,补充细胞内的 cccD ) ( ) 9 lar , rcDNA ,相对分子量为 16～2 0 ×10 ,全长 NA 库 ,使每个肝细胞中保持大约 5～50 个 cccDNA 约为 32kb 。在 HBV 的生活周期中 ,共价闭合环状 分子 ;另一方面与病毒蛋白装配成新的完整 HBV , ( ) ( ) [3 ] DNA covalently closed circular DNA ,cccDNA 的形 释放至细胞外 ,再感染健康的肝细胞 见图 1 。 成是关键一步 ,它是 HBV 的原始复制模板 ,对乙肝 病毒的复制及感染状态的建立具有十分重要的意 义。cccDNA 的半衰期约为 33 ～70 天[1 ] , 只要肝细 胞中还存在 cccDNA , 乙肝病毒的复制就不会停止 , 即使在药物的强烈抑制下 ,肝细胞中的 cccDNA 仍 然在少量复制 ,因此停用药物后 ,常可见到患者病情 的反复。只有清除细胞核内的 cccDNA ,才能彻底 清除乙肝患者病毒携带状态 ,清除 cccDNA 是目前 抗乙肝病毒药物研究的一个重要目标[2 ] 。本文就 有关 cccDNA 的研究进展综述如下: 一、HBV cccD NA 的形成 图 1 　细胞中 HBV 的感染过程 HBV 侵入人的肝细胞 ,在细胞质中脱去核壳 , 形成 rcDNA 。rcDNA 进入肝细胞核中解脱负链 5′ 二、HBV cccD NA 的常用检测方法 端连接的末端蛋白、正链 5′端的 RNA 残段 ;依赖宿 根据 cccDNA 与 rcDNA 在结构和理化特性上 主细胞的 DNA 聚合酶补齐两条链上的缺口 , 并进 的不同 ,可以建立检测 cccDNA 的方法: ( 1) rcDNA ( ) 一步折叠、扭曲形成超螺旋结构的 cccDNA ,并以 cc 能与蛋白质共价结合 ,cccDNA 则不能。 2 rcDNA cDNA 为模板转录为不同大小的 mRNA ( 35 Kb 、 的双链是不对称的 , 全长的一链与病毒 mRNA 互 2 4 Kb 、2 1 Kb 、08 Kb mRNA) ,从而翻译各种病毒 补 ,为负链 ,较短的一链为正链。在正链和负链上均 蛋白。其中 35 Kb 的 mRNA 作为逆转录模板 ,利 存在缺口 ,两链 DNA 通过 5′端250 ～300 个互补碱 用病毒的逆转录