2016内蒙古职校食品分析教案：第三章 营养成分的测定06.docVIP

第九节 食品中维生素的测定 1教学目标：使学生掌握荧光定量分析的依据，了解维生素测定1、B2、C的测定方法及原理。 2教学内容：主要讲维生素测定意义荧光分析法1、B2、C的测定方法及原理。 3重点和难点：维生素A测定定量分析一、维生素及其测定意义 脂溶液性维生素包括维生素A、维生素D、维生素E、维生素K。水溶性维生素包括硫胺素（维生素B1）、核黄素（维生素B2）、吡哆醇（维生素B6）、烟酸（尼克酸、於酸、维生素PP）、氰钴胺（维生素B12）、抗坏血酸（C）等。 二、维生素的测定 （一）荧光分析法简介（Fluorescence analysis ） 1、有关荧光的概念 （10－9）2、定性分析3、定量分析IF = f c 式中：IF——物质被紫外线照射后所发射出的荧光强度。 f——物质对紫外线的吸收系数。 C——溶液浓度。 即： C s Cx Cs．IFｘ ——= ———　　　　　　　　Cx＝ ＿＿＿＿＿＿＿ IF s IF x　　　　　　　　　　　　　　IFｓ Ｃｓ＿标准溶液浓度； IFｓ＿标准溶液荧光强度 Cx＿样品溶液浓度； IF x　＿样品溶液荧光强度。 4、仪器 测量荧光的仪器有光电荧光计和荧光分光光度计。 （二）维生素A(vitamin A)及其测定 维生素A采用国际单位表示 ，与其重量的关系为： 1 IU维生素A≈0.3μg维生素A醇≈0.344μg乙酸维生素A １、三氯化锑比色法 （1）原理维生素A（2）方法提要 用乙醚提取样品中的脂溶性物质（含维生素A）→皂化（加入氢氯化钾的醇溶液，在水浴上回流皂化，使样品中的脂肪转化为皂化物而溶于水中）→乙醚提取维生素A（因为脂肪皂化后不溶于乙醚，而维生素A在碱性环境中不破坏，可用乙醚分离出来）→净化处理乙醚提取液（温水、KOH溶液洗涤，洗涤水溶液物质）→挥干乙醚→氯仿溶解→620nm测定，与标准系比较，比色定量（在比色皿中进行，加醋酸酐脱水、加三氯化锑显色）。 、紫外分光光度法 原理 ）方法要 抽提脂溶性物→皂化→提取→洗涤→蒸发醚层→异丙醇定溶→紫外分光光度测定，波长328nm。 （三）胡萝卜素及其测定 1 IUβ-胡萝卜素 ≈0.6μgβ-胡萝卜素 1μgβ-胡萝卜素相当于0.167μgVitA 测定胡萝卜素的常用方法是柱层析或纸层析。 原点至样品斑点中心的距离 Rf　　=—————————————— 原点至溶剂前沿的距离 （四）维生素B1（thiamin）及其测定 1、原理维生素B1维生素B1维生素B12、方法提要 硫色素荧光法分四步：维生素B1的提取、分离提纯、氧化与硫色素的提取、荧光测定。 （1）提取维生素B1B1游离，要加入淀粉酶或蛋白酶才能转化为游离态。 （2）分离提纯人造浮石维生素B1维生素B1交换柱维生素B1维生素B1（3）氧化维生素B1或溴化氰维生素B1维生素B1或溴化氰维生素B1（4）荧光测定激发光λ365nm，发射光λ435nm，分别测定样品和标准液的荧光强度。荧光计用标准物质硫酸奎宁校正。 维生素B1维生素B1 4、注意事项维生素B1（五）维生素B2（riboflavin）及其测定 -荧光分析法（核黄素荧光法） １、原理 维生素B2Na2S2O4前后的荧光强度，其差值为维生素B2、方法提要 分四步：样品处理、沉淀杂质、纯化、测定。 （）样品处理（）沉淀杂质）（）纯化（）测定激发光λ440nm，发射光λ525nm，连二亚硫酸钠（Na2S2O4），荧光红钠。Na2S2O4前后的荧光强度。 （5）仪器校正 每次测定前用荧光钠校正，使读数稳定在某个值上。 （六）维生素C（vitamin C, ascorbic acid）及其测定还原型抗坏血酸 脱氢抗坏血酸 二酮古乐糖酸 2，6—二氯靛酚滴定法2，6—二氯靛酚维生素C2，6—二氯靛酚维生素C2，6—二氯靛酚维生素C2，6—二氯靛酚维生素C2，6—二氯靛酚2　　2，4—二硝基苯肼法维生素C二酮古乐糖酸二酮古乐糖酸2，4—二硝基苯肼维生素C二氯靛酚滴定法2，4—二硝基苯肼法维生素C维生素C维生素C二酮古乐糖酸维生素C维生素A测定定量分析中国轻工业出版社,2003. 2　食品分析,　陈有化,蔡洪伟主编.　北京：化学工业出版社　　2004 3　食品分析及实验　刘长虹