维多利亚蓝B分光光度法测定硫酸软骨素.pdfVIP

第26卷，第6期 光谱学与光谱分析 20O and June，2006 6年6月 SpectroscopySpectraIAnalysis 维多利亚蓝B分光光度法测定硫酸软骨素 陈媛媛，蒋治良。，李振中，周苏梅，孙双娇 广西师范大学资源与环境学系，广西桂林541004 r衄处有一吸收峰。它与硫酸软 摘要在pH4．o醋酸一醋酸钠缓冲液中，阳离子染料维多利亚蓝B在614 骨素(chs)反应生成缔合微粒后导致614nIn处的吸收峰降低，其吸光度差值与ch浓度在o．1～5旭· mL_1范围内呈良好的线性关系。据此建立了一个简便、快速、准确测定硫酸软骨素含量的分光光度新方法。 该法已用于合成样及康得灵注射液样品分析，结果满意。 主题词维多利亚蓝B；硫酸软骨素；缔合微粒；分光光度法 03 中图分类号：0657．6文献标识码：A 文章编号：1000—0593(2006)06—1148 型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；岛津R卜540 引言 型荧光分光光度计(日本岛津公司)。 ；1．o×10叫 chs标准品(sIGMA公司)：100”g·rnL 硫酸软骨素(chondromnsulfate，简称chs)是一类动物Ⅱ10卜rnLl vB溶液；pH3．6～4．8醋酸一醋酸钠缓冲液； 性粘多糖，由动物喉骨、鼻软骨、气管、或骨键、韧带等含 nlL容量瓶， chs样品溶液：取一定量的康得灵注射液于50 chs的软骨组织制取“]。Chs是治疗骨关节疾病药物的主要定溶，待测。用水均为二次去离子水。 成分之一。对于关节炎、特别是中老年人最常见的退化性关 1．2实验方法 节炎和关节疼痛、修复关节接头的软骨、关节格格发响有特 在10mI，比色管中，分别加入o．50“，pH4．o缓冲液， 殊的功效。目前，chs测定方法主要有高教液相色谱法口’…、 o，50mL 光度滴定法“]、分光光度法嘲等。高效液相色谱法测定c11s加蒸馏水定容到5mL刻度，摇匀。放置15嘶n，以水为参比 的最低检测限为lo“g·Ⅱ山，操作相对较复杂。用十六烷 白，测定吸光度Ao值。计算△A=A—A。 基三甲基溴化铵光度滴定法oo测定chs的线性范围为o．1～ o．3“g·mL，但操作过程复杂。基于天青A与chs建立的 分光光度法具有灵敏、快速、简便的特点，其线性范围为o 2结果与讨论 1 L“。 ～30牡g·mL 维多利亚蓝B(简称Ⅶ)是一种阳离子染料，已用于脱 2．1体系的吸收光谱和共振散射光谱 氧核糖核酸、亚硝酸盐等的分光光度分析…，但未见利用维 分别研究了维多利亚蓝B、亚甲基蓝、结晶紫、铬天青 多利亚B与c11s形成缔合微粒光度法测定chs的报道。维多 利亚蓝B分子的氨基带正电荷，ch的磺酸基和羧基带负电 验结果表明，维多利亚蓝B灵敏稳定。图l表明，维多利亚 荷，二者通过静电引力和疏水作用力形成缔合物微粒，发生 蓝B在614rⅡn处有一最强吸收峰；随着chs浓度的增加， 变色效应，吸光度