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大豆异黄酮的提取及纯化 学 院： 食品与生物工程学院 班 级： 食质11—01班 姓 名： 韩向前 学 号： 541103040110 二0一肆年六月十一 大豆异黄酮的提取及纯化 摘 要：综述了大豆异黄酮提取及纯化的各种方法，如：乙醇提取法、微波萃取法、超临界流体萃取法、沉淀法、超滤法、固相萃取法等，简要介绍了原理及目前应用状况并对各方法特 点作出比较分析，以期为大豆异黄酮进一步的研发提供技术选择参考。 关键词：大豆异黄酮；提取方法；纯化 大豆异黄酮具有抗氧化活性弱雌激素活性、抗溶血活性以及抗真菌活性等功效，在预防和治疗白血病、骨质疏松、妇女更年期综合症、衰老、老年痴呆及抗辐射等方面作用突出，已引起医药卫生、食品、农业等领域的广泛关注[1—2]。本文主要介绍了大豆异黄酮的两种提取及纯化方法。 1 大豆异黄酮的提取 目前大豆异黄酮的提取方法很多，主要依据大豆异黄酮糖苷 和 苷元 的性质 及其 杂质来 选择相应方法，其中最经典的是溶剂浸提法。该法具有提取率 高 、产品稳定等优点，依提取溶剂不同分为：热水、弱碱性水、酸水解、乙醇一水、甲醇一水、丙酮、乙酸酯、正丁醇等，采用较多的是醇一水系提取法。随着新技术的出现，微波萃取、超声波萃取、超临界流体萃取成为重要的辅助提取手段。 1.1 乙醇—水系溶剂萃取法 天然大豆异黄酮多以苷的形式存在，提取方法一般采用有机溶剂萃取法，其中乙醇一水系和甲醇一水系提取效果最佳，由于后续提取工艺、生产成本及 食用毒性等因素，乙醇一水系提取在生产中应用普遍。关海君等[3]对乙醇一水系提取法进行优化，以浸取溶剂浓度、时间、温度以及浸取溶剂与脱脂豆粕比例四个因素在三水平上作正交试验，从而得出最优组合。以80%乙醇水溶液，15:1的物料比（料溶比），在 60℃下浸取10h为最佳提取条件，浸取率可达90%以上。乙醇提取相对简便、对设备要求低，但提取率不高，后续处理和精制较为繁琐，需与层析、离心沉淀、膜技术等结合使用，达到分离纯化的目的。 1.2 微波萃取法 微波萃取法的原理在于微波对萃取溶剂和物料的加热功效，能使整个系统均匀加热，升温迅速，效果优于一般加热方可增强提取率、干燥杀菌和除异味等，但也仅处于实验室小型研究阶段。张永忠等[4]采用微波法对脱脂豆粕进行前处理与乙醇水溶 剂提取结合，提 高异黄酮溶出率，增强浸取选性，提高浸取液纯度。李雪玲等[5]以乙醇为溶剂 ，研究异黄酮微波辅助提取工艺，通过单因素和正交试验，确定优化参数：80目豆粉，微波功率240 W，体积分数60%乙醇，辐射90 S，液固比10：1，提取2次，比常规浸提省时，节约溶剂，提取率高。 1.3 超临界流体萃取法 开发新的、高回收率的大豆异黄酮生产工艺是目前国内外研究的热点。超临流体萃取技术利用 超临界流体在有机溶剂中的较大溶解度，利用压力和温度引起溶剂体积膨胀，降低其溶剂化能力，按极性大小、沸点高低及分子量大小依次使溶解物质析出。采用超临 CO2萃取是今后企业生产的主要技术，具有提取率高 、能耗低、产品纯度好、流程简便和无有机溶剂残留等优 ，对设备要求较高。超临界CO2萃取可保持制品活性，袁其朋等[6]测定了染料木苷和大豆黄苷的雾点压力，通过有机溶剂萃取和超临界CO2抗溶剂技术得到的大豆异黄酮含量高于90 %回收率大于78 % 。 1.4 其它提取方法对比，表1。 2 大豆异黄酮的纯化 大豆异黄酮粗提液中包含油脂、蛋白质、糖等，要得到高纯度异黄酮及其单体成分，须对其粗提物进一步分离纯化。主要有沉淀法、超滤法、柱色谱法 (主要是聚酰胺吸附法、活性炭吸附法和大孔树脂吸附法 )、高速逆流色谱法、膜分离技术、固相萃取等 ，随着分离技术的不断创新，新技术、新方法得到了很大的发展，涌现出诸如聚酰胺吸附法、活性炭吸 附法、高速逆流色谱法、模拟移动床色谱技术等新手段。 2.1 沉淀法 粗提液中大量蛋白质对异黄酮的浓缩提纯影响极大，沉淀法主要是进行脱蛋白处理。沉淀法中应用比较广泛的是离心法，是“绿色”纯化技术，不需要使 用金属盐和有机溶剂等化学物质，利用大豆异黄酮水溶性较差，离心条件下易与其他杂质分离沉淀析出的特性。除此，还有等电点沉淀法、乙醇沉淀法、重金属沉淀法、盐析沉淀法、有机溶剂沉淀法等，乙醇沉淀法效率低，进一步分离时需增加脱蛋白质处理过程；等电点沉淀法在生产中可行，但去除蛋白质能力一般。 2.2 超滤法 超滤法是利用外界能量的推动，利用高分子薄膜，依各组分在膜中传质的选择性差异，对多种物质进行分离、分级、提纯和富集。超