胍基壳聚糖的止血性能和细胞毒性.docVIP

胍基壳聚糖的止血性能和细胞毒性 姚心培1，2，荆妙蕾1，关 静2 (1天津工业大学纺织学部，天津市 300387；2军事医学科学院卫生装备研究所，天津市 300161) 引用本文：姚心培，荆妙蕾，关静. 胍基壳聚糖的止血性能和细胞毒性[J].中国组织工程研究，2017，21():906-910. DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.06.015 ORCID: 0000-0003-3995-9641(姚心培) 文章快速阅读： 文题释义： 体外凝血指标：活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间、凝血酶时间是常规的凝血检查项目，用于检验凝血系统出止血能力。通过对此3项指标测试，从而判断材料对内源性凝血途径、外源性凝血途径和共同途径的作用情况。 细胞毒性评价指标：MTT比色法是细胞毒性的常用检测方法，能反映活细胞的生长状况。采用MTT比色法计算出细胞增殖率，依据标准鉴定材料的毒性等级。为了更直观的反映材料作用后活死细胞数量，又采用荧光染色方法将活死细胞用绿色及红色荧光加以区分，充分说明了材料的细胞毒性水平。 摘要 背景：壳聚糖是一类具有良好止血、抗菌和吸附能力的生物材料，在其氨基处引入胍基基团能使其抗菌性和吸附性能提高，是化工分离的常用材料。然而，接枝胍基后对壳聚糖的凝血性能是否有影响，却鲜有研究。 目的：测试胍基壳聚糖的体外凝血性能及细胞毒性，探讨其作为止血材料的可能性。 方法：以壳聚糖和精氨酸为原料，NHS和EDC为偶联剂制备胍基壳聚糖粉末，通过全血凝固时间和3项体外凝血指标(活化部分凝血活酶时间、凝血酶原时间、凝血酶时间)对胍基壳聚糖的凝血能力进行初步评价。将胍基壳聚糖的浸提液与小鼠成纤维细胞共同培养，通过MTT比色法和荧光显微镜观察其对细胞生长状况的影响。 结果与结论：①胍基化壳聚糖缩短了全血凝固时间，具有一定的止血能力；②体外凝血指标结果表明，胍基化壳聚糖不通过传统的内外源性凝血途径发生作用，目前无确切研究证明胍基基团能促进凝血，提示该作用可能依赖于壳聚糖；③MTT检测结果显示，胍基壳聚糖细胞增殖率为87.8%，毒性反应为1级；④荧光染色照片显示活细胞数量很多，死细胞很少，说明胍基壳聚糖对细胞的毒性作用低。 关键词： 生物材料；材料相容性；胍基；壳聚糖；体外凝血；细胞毒性；国家自然科学基金 主题词： 胍；壳聚糖；止血；细胞增殖；组织工程 基金资助： 国家自然科学基金 Hemostatic property and cytotoxicity of the guanidine modified chitosan Yao Xin-pei1, 2, Jing Miao-lei1, Guan Jing2 (1Department of Textile, Tianjin Polytechnic University, Tianjin 300387, China; 2Institute of Medical Equipment, Academy of Military Medical Sciences, Tianjin 300161, China) Abstract BACKGROUND: Chitosan is a kind of biomaterial with good hemostatic, antibacterial and absorption properties. The guanidine modified chitosan holding better antibacterial and absorption abilities is a commonly used chemical separation material. However, its coagulation property is still unclear. OBJECTIVE: To evaluate the in vitro hemostatic property and cytotoxicity of the guanidine modified chitosan, and to explore its availability as a hemostatic material. METHODS: The guanidine modified chitosan was synthesized with the raw materials of chitosan and arginine, and the coupling agents of EDC and NHS. The coagulation ability was evaluated preliminarily