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人全血单个核细胞分离液说明书
本品只能用于科学研究,不能用于临床检测
本品于GMP 标准下生产
人全血单个核细胞分离液说明书
【包装规格】
200ml/瓶
【实验前准备】
A.适用仪器
最大离心力可达1200g 的水平转子离心机
B.耗材
产品名称 产品货号 产地
15ml 离心管散装 339650 美国NUNC
15ml 离心管架装 339651 美国NUNC
50ml 离心管散装 339652 美国NUNC
50ml 离心管架装 339653 美国NUNC
无菌胶头滴管或塑料滴管
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。
首先根据样本量大小,分以下几种情况:
一、 使用15ml 离心管时:
情况A:血液样本量小于3ml 时,实验方法如下:
1. 取一支15ml 离心管,加入3ml 分离液。
2. 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上,400-650g,离心20-30min (注:根据血
液样本量确定离心条件,血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件
需客户自行摸索,以达到最佳分离效果)。
3. 离心后,此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色单个
核细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色单个核细胞层到另一15ml 离心管中,向所得离心管
中加入10ml 清洗液 (产品编号:2010X1118),混匀细胞。
5. 250g,离心10min。
6. 弃上清。
7. 用吸管以5ml 清洗液(产品编号:2010X1118)重悬所得细胞。
本品只能用于科学研究,不能用于临床检测
本品于GMP 标准下生产
8. 250g,离心10min。
9. 重复6、7、8,弃上清后以0.5ml 后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况B:血液样本量为3-6ml 时,实验方法如下:
1. 取一支15ml 离心管,先加入与血液样本等量的分离液。
2. 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上,400-650g,离心20-30min (注:根据血
液样本量确定离心条件,血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件
需客户自行摸索,以达到最佳分离效果,但最大离心力最好不超过1000g)。
3. 离心后,此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色单个
核细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4. 用吸管小心吸取第二层环状乳白色单个核细胞层到另一15ml 离心管中,向所得离心管
中加入10ml 清洗液 (产品编号:2010X1118),混匀细胞。
5. 250g,离心10min。
6. 弃上清。
7. 用吸管以5ml 清洗液(产品编号:2010X1118)重悬所得细胞。
8. 250g,离心10min。
9. 重复6、7、8,弃上清后以0.5ml 后续实验所需相应液体重悬细胞。
二、使用50ml 离心管时:
情况A:血液样本量为6-10ml 时,实验方法如下:
1. 取一支50ml 离心管,先加入与血液样本等量的分离液。
2. 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上,500-950g,离心20-30min (注:根据血
液样本量确定离心条件,血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件
需客户自行摸索,以达到最佳分离效果,但最大离心力最好不超过1200g)。
3. 离心后,此时离心管中由上至下分为四层。第一层为血浆层。第二层为环状乳白色单个
核细胞层。第三层为透明分离
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