以hplc对丹参素钠有关物质检查及稳定性探测.docVIP

以HPLC法对丹参素钠进行有关物质检查及稳定性研究 摘要 目的：以HPLC法对丹参素钠原料药进行有关物质检查，制定丹参素钠有关物质检查标准。方法：以HPLC法，采用C18反相色谱柱（150mm x 4.6mm x5μm），流动相为甲醇：水：甲酸=5:89:1，流速1.0ml/min，检测波长280nm，柱温为室温，进样量5μl。稳定性试验：日光，灯光和高温条件下测定杂质的变化规律。结果：HPLC法能够很好的将杂质和丹参素钠分开，杂质含量也可以确定，只因为条件有限没有确定杂质是什么。稳定性试验表明丹参素钠原料药在高温后会出现新的杂质，而且已有杂质也在增多。结论：该方法可以准确、快速的检测杂质的含量；丹参素钠原料药有热不稳定性，贮存过程中容易产生新的杂质，应该密封低温贮存。 关键词 HPLC；丹参素钠；质量标准;稳定性；含量变化规律 丹参素钠2-羟基-3-（3，4-二羟基苯基）-丙酸钠，酚性芳香酸类化合物，为白色针状结晶, 溶于甲醇、水，不溶于氯仿、乙醚。丹参素在自然界中不稳定，故把其做成钠盐，功效和丹参素一样。多用于活血化瘀，理气止痛，用于胸憋闷，心绞痛。μm）;流动相：甲醇：水：冰乙酸=5：94：1;柱温：室温;波长：280nm;进样量：5μl;速度： 1 ml/min。本文色谱条件下，溶剂对测定并无干扰。 3 测定方法 3.1 溶液配制 流动相配制：甲醇：水：冰乙酸=5：94：1，超声处理15min，配得流动相 供试品配制：分析天平减量法称丹参素钠粉末14.14mg，转移至样品管中，加入流动相5ml，超声处理，得A溶液（C=2.828mg/ml）；微量移液器精密量取1mlA溶液至样品管中，微量移液器加入流动相9ml，超声处理，得B液（C=0.2828mg/ml）；精密量取1mlB溶液至另一样品管中，微量移液器加入流动相9ml，超声处理，得C液。 3.2 HPLC测定有关物质 精密量取供试品溶液5μl，注入液相色谱仪中，调节仪器灵敏度，使主峰的峰高为满量程的20%～25%；记录色谱图置主峰保留时间的2倍以上，以内标法计算杂质的含量，杂质含量不得过1% 4 方法的专属性试验（稳定性试验） 4.1 破坏性试验 采用上诉方法分别对丹参素钠原料药流动相溶液以及灯光照、日光照和加热破坏的丹参素钠原料药的流动相溶液分别进行检测，试验结果显示杂质峰与主峰均有较好的分离，互不干扰测定，经考察该方法对丹参素钠有良好的专属性，对可能的降解产物及有关物质有良好分辨率，见图。 经灯光照、日光照和加热破坏的丹参素钠的流动相溶液均采用浓度为0.2828mg/ml的溶液，破坏方法如下： 灯光照：取上述溶液适量，置日光灯下照射45h，在各期间取样测试。 日光照：取上述溶液适量，置太阳光下直射7h，再取样测试。 加热破坏：取上述溶液适量置样品管内，封口，置90℃的水浴中加热破坏5h，然后取样测试。 A:丹参素钠原料药 B：灯光照处理45h C:日光照处理7h D：加热破坏 由破坏性试验看出：丹参素钠原料药有热和光不稳定性，而各破坏条件下的降解产物峰对主峰基本无干扰，分离效果良好，说明该色谱条件可以用于本品的有关物质检查。 4.2 加温加速试验及稳定性探究 4.2.1 方法和结果 取C=2.828mg/ml溶液适量置样品管内，封口，置90℃的恒温水浴中加热破坏，不同时间间隔取样，以3.2方法测定有关物质含量。 表1 丹参素钠原料药（C=2.828mg/ml）加速试验含量测定结果 样品处理（C=2.828mg/ml） 保留时间（min） 峰面积 加热90℃ 3.5h 13.64 2619930.250 15.007 12765.324 18.373 123294.297 21.507 13120.000 加热90℃ 4.5 h 14.323 3154075.500 19.19 146609.125 20.923 89246.719 加热90℃ 5 h 14.315 2291581.750 19.24 102740.703 120617.898 加热90℃ 5 h两天后 10.298 141826.703 13.232 9812465.000 17.665 176151.297 原料药 11.22 13.773 2242069.000 18.248 21620.199 Jin-lan Zhang, Ming Cui, Yun He, Hai-lan Yu, De-an Guo.Chemi