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生态学实验方案(元素类) 南方林业生态应用技术国家工程实验室 前言 为科研工作提供参考，提高效率，规范实验方法，制定此实验方案。 本实验方案是在中科院南土所及田大伦教授研究的基础上，经多次实践检验，结合本实验室实际情况，加以补充完善而成，可确保其正确指导性及实际可操作性；实验步骤在保证完整充实的基础上，力求简化、层次清晰、一目了然；对容易忽视或误操作部分予以划线突出显示。 由于个人研究范围限制，本材料重点偏向于土壤/植物元素测定，未涉及其他方面，如水、微生物等，希望得到相关研究人员的支持补充！ 欢迎大家提出宝贵建议和意见！ 目录 1.土壤/植物有机碳测定 2.土壤/植物全氮测定 3.土壤全磷测定 4.土壤速效氮测定 5.土壤速效钾测定 6.土壤速效磷测定 7.土壤硝态氮测定 8.土壤铵态氮测定 9.待测液制备 10.大量元素测定 11.微量元素测定 土壤/植物有机碳测定精简 (重铬酸钾水合加热法) 1：溶液配制 （1）1mol/L重铬酸钾：重铬酸钾105度烘干2小时，用1L烧杯称取49.04g，搅拌完全溶解，容量瓶定容1L； （2）0.5mol/L硫酸亚铁：用1L烧杯称取140.0g硫酸亚铁溶于400ml水中，加15ml浓H2SO4，冷却后容量瓶定容1L； （3）硫酸亚铁标定：抽取重铬酸钾10毫升放入三角瓶中，加10毫升水，加浓硫酸3毫升和指示剂2滴，用硫酸亚铁溶液标定，M FeSO4 =（1.0×10）/V FeSO4 . 2：实验步骤 （1）用500毫升三角瓶称0.5g左右土样（精确到0.0001）（植物样品0.0200g）； （2）加入10 毫升重铬酸钾溶液，摇晃均匀； （3）加入20毫升浓硫酸 ，小心摇晃均匀；（小心缓慢加；可以用25毫升量筒） （4）静置30分钟； （5）加入220毫升蒸馏水； （6）加3-4滴邻菲罗啉指示剂，用硫酸亚铁滴定，橙黄至蓝绿至终点砖红；记录硫酸亚铁体积； 3：结果计算 C 有机碳（%）= [V0 ：滴定空白用去FeSO4体积（一般20毫升左右）；V：滴定样品用去FeSO4体积；] 土壤/植物全氮测定精简(凯氏定氮) 1：溶液配制 （1）混合加速剂：硫酸钾： 硫酸铜：硒粉=100:10:1混合研细，过80网筛； （2）指示剂：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100毫升酒精； （2）40%氢氧化钠：一瓶500g氢氧化钠溶于1250毫升蒸馏水；（无需称量） （3）20g/L硼酸：20g硼酸溶于1L水中；加上述指示剂10毫升； （4）0.02mol/L盐酸：84毫升浓盐酸稀释至1升配置1mol/L盐酸；取1mol/L盐酸20毫升稀释至1升，即0.02mol/L； 2：实验步骤 （1）称土2g（植物是0.02g）（精确万分之一）至凯氏管；加2g左右加速剂（无需精确）；加5毫升浓硫酸（植物是3毫升）；（做空白2份，不加土，其他均同） （2）消煮：380度150分钟；（开机长安最左侧按钮几秒钟，闪动界面，设置成150，其他任何参数勿动！水龙头打开） （3）蒸馏：开机，选择自动，参数设置，逐项修改；稀释水10毫升；硼酸20毫升；氢氧化钠30毫升（植物20毫升）；时间4:30；淋洗水5毫升；关防护门，确认开始； （4）滴定：0.02mol/L滴定，蓝绿至无色，微红终点，记录盐酸体积； 3：结果计算 N(%)= [C为盐酸浓度；V为滴定盐酸体积；V0为空白] 土壤全磷测定精简(钼锑显色) 1：溶液配制 （1）指示剂：0.2g 2,6-二硝基酚溶于100毫升蒸馏水； （2）酒石酸锑钾溶液：小烧杯称酒石酸锑钾0.5g，加100毫升水溶解； （3）钼酸铵溶液：1升烧杯加300毫升水，加热60度，加10g钼酸铵； （4）硫酸溶液：1升大烧杯加400毫升水，加126毫升浓硫酸； （5）硫酸钼锑储备液：3和4均冷却后，4加入3，再加入2（顺序不能颠倒）；稀释1升； （6）钼锑抗显色剂：称取15g抗坏血酸溶于1升钼锑贮备液中；（现配现用）； （7）磷标准贮备液：准确称取105℃下烘干两小时的磷酸二氢钾0.4390g，用水溶解后，加入5毫升浓硫酸 ，定容1升，即100ppm，冰箱保存； （8）5ppm磷标准溶液：准确吸取5毫升磷贮备液至100毫升容量瓶。 2：实验步骤 （1）P标准曲线配置：抽取5ppm磷标液0、2、4、6、8、10ml于50毫升容量瓶；加2滴二硝基酚指示剂；加容量瓶大约1/2水；加5毫升钼锑抗显色剂，定容摇匀； （2）样品：抽取2毫升至50毫升容量瓶，后加溶液同上； （3）表曲及样品静置显色20分钟，可见分光光度计700nm处比色；记录。 3：结果计算 （1）通过标准曲线得出方程（仅供参考A=2.264C-0.516）A吸光度C浓度； （2）全P（mg/kg）=（C*比色体积*分取倍数）/（母液