细胞生物学未打印2细胞凋亡与细胞衰老-2013.pptVIP

Hayflick极限 体外培养的细胞增殖能力不是无限的，传代次数有一定的界限，称为“ Hayflick极限”。 正常细胞具有有限分裂次数 癌细胞（HeLa细胞）能在体外无限增殖 传代次数与物种寿命有关：小鼠寿命3年，传代12次；龟寿命200年，传代140次。 传代次数与个体年龄成反比：人胚胎，40-60代； 幼年，20-40代；成年，10-30代；早老病儿童，2-10代。 二、细胞衰老的机制 端粒酶（Telomerase） 端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白复合体，属于反转录酶。它以自身的RNA作为端粒DNA复制的模板，合成出DNA序列后添加到染色体的末端并与端粒蛋白质结合，从而稳定了染色体的结构。 在正常人体细胞中，端粒酶的活性受到相当严密的调控，只有在造血细胞、干细胞和生殖细胞，这些必须不断分裂复制的细胞之中，才可以侦测到具有活性的端粒酶。 端粒酶的存在，就是把 DNA 复制机制的缺陷填补起来，即由把端粒修复延长，可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗，使得细胞分裂复制的次数增加。 由于端粒酶在正常体细胞中几乎不表达而在肿瘤细胞中表达量较大，故将其作为肿瘤治疗的靶点，直接抑制其活性或是从基因层面进行操作，来抑制癌细胞分化，治疗癌症。 （1）确保正常发育生长：清除多余的细胞，免疫耐受的形成等生理病理过程具有重要意义。（凡是不能区分“自我”与“异我”抗原的淋巴细胞均发生凋亡） （1）确保正常发育生长：清除多余的细胞，免疫耐受的形成等生理病理过程具有重要意义。 （2）维持内环境稳定：清除体内多余、受损、突变、衰老的细胞 （3）积极防御功能：对病毒感染细胞阻止 天花病毒CrmA(cytokine response modifier)就是典型的casepase抑制剂，抑制了感染细胞的凋亡，从而有利于病毒增殖。 非洲猪瘟（ASFV）LMW5-h1基因与原癌基因bcl-2和EBV的bhrf1基因有同源性，通过抑制受感染细胞的Apoptosis，而使病毒持续性复制，感染细胞得以长期存活 。 流感病毒的NS1蛋白在感染早期其诱导凋亡的功能域被掩盖，从而抑制受感染细胞的Apoptosis，使病毒持续性复制。但在感染后期，其凋亡结构域暴露出来，又诱导感染细胞的Apoptosis，从而促进病毒粒子的释放。 Casepase作为肿瘤药物 重要知识点 基本概念： Hayflick极限；端粒酶；细胞自噬 细胞凋亡与细胞坏死的比较 细胞凋亡的外源途径和内源途径 谢谢！ 吖啶橙 (AO)能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，使之发出明亮的绿色荧光。溴乙锭 (EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：①活细胞，核染色质着绿色并呈正常结构；②早期凋亡细胞，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状；③非凋亡的死亡细胞，核染色质着橘红色并呈正常结构；④晚期凋亡细胞，核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状。 病原感染 宿主细胞 凋亡 坏死 （二） 细胞自噬 当细胞在缺乏营养或发生应激反应时，可发生细胞自噬现象。指细胞内的溶酶体降解自身细胞器和其他大分子的过程。 细胞开始自噬时，细胞质中形成大量由双层膜包裹着的待降解物质的泡状结构，称自噬泡。随后，自噬泡与溶酶体发生融合，自噬泡所包裹着的待降解物质进入溶酶体，此时的溶酶体称作自噬溶酶体。在自噬溶酶体中，待降解物质在各种酶的作用下分解成氨基酸和核苷酸等，并进入三羧酸循环，产生小分子和能量（ATP），再被细胞所利用。 细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后，送入溶酶体(动物）或液泡（酵母和植物 ）中进行降解并得以循环利用。 在机体受到脊髓灰质炎病毒和SARS冠状病毒等病原体感染时，细胞自噬具有双重作用。一方面，细胞自噬能将进入胞内的病原体，通过降解作用加以清除，保护正常细胞不被感染；另一方面，细胞自噬形成的自噬泡双层膜结构成为病毒或细菌的“避难所”，使其逃避宿主的清除作用。 细胞自噬与细胞凋亡、细胞衰老一样，是十分重要的生物学现象，参与生物的发育、生长等多种过程。细胞自噬的异常导致癌细胞的出现。 机体结构 细胞增殖 细胞分化 细胞凋亡 细胞信号转导 染色体 （DNA与蛋白质的相互作用） 衰老 2013-10-23 hbzhou@mail.hzau.edu.cn Annexin V/PI双染色法 Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷酯结