糖尿病是一种常见多发的慢性代谢性疾病.docVIP

糖尿病是一种常见多发的慢性代谢性疾病，最严重最常见的慢性并发症是糖尿病肾病，据资料表明，糖尿病肾病的发病率在国内占糖尿病的0.9%-36%[1]。 其早期肾脏病理改变大多是可逆的，但终末期糖尿病肾病的5年生存率小于20%[7]。因此及早预防及诊治DN至关重要[2]。以往，对糖尿病肾病早期诊断的常用指标有尿微量白蛋白、血清胱抑素C、血清高敏C反应蛋白、NAG、α1-微球蛋白等，这些指标虽有助于DN的诊断，但缺乏特异性和灵敏性。而早期肾小球微穿刺又因为操作复杂，过程痛苦等原因不易被患者接受[8]。因此，寻找一种灵敏度高，特异性强的诊断指标迫在眉睫。本文测定了31例糖尿病早期肾脏功能受损患者、33例糖尿病非早期肾脏功能受损患者和25例健康人血清抵抗素含量，现将结果报告如下： 一、 材料与方法 1.1标本来源 大连医科大学附属第一医院内分泌病房2型糖尿病患者血清，其中男30例，女34例，年龄20～80岁，所有研究对象在取样前均排除大血管病变, 排除患有急慢性感染、心功能不全、肝肾功能不全、原发性肾小球疾病及其他自身免疫性疾病者, 排除使用胰岛素及胰岛素增敏剂者。各组对象的性别、年龄等一般临床特征比较差异无统计学意义（P0.05）。具有可比性。根据AM/Cre将2型糖尿病患者分为2组，AM/Cre在30～300之间31例，男22例，女9例。AM/Cre30的患者33例，男13例，女30例。另设健康对照组25例，其中男18例、女7例，均从大连医科大学附属第一医院健康体检人员中筛选，排除糖尿病、高血压病、肾病等其他相关疾病。血样要求:所有实验对象均在空腹12h以上于清晨抽取肘静脉血2ml加于肝素抗凝管中，离心分离，取抗凝血清置于-70°C低温冰箱中待测定抵抗素和血清胱抑素C。所有血样均来自大连医科大学附属第一医院检验科。尿样要求：取晨尿10ml，3500r/ml，离心10min，取上清液检测尿微量白蛋白（mALB）。 1.2主要试剂 1.2.1ELISA试剂盒： 北京奇松生物科技有限公司瑞士Tecan Sunrise酶标仪早稻田(北京)生物科技发展有限公司上海办早稻田(北京)生物科技发展有限公司上海办°C恒温箱 （5）BNⅡ免疫特种蛋白分析仪：上海SIEMENS公司生产。 （6）日立7600全自动生化分析仪：北京九强生物技术有限公司生产。 1.4试验方法 1.4.1ELISA法测血清抵抗素含量 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4°C。分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。将浓度依次为0 ng/ml， ng/ml，ng/ml， ng/ml，ng/ml，ng/ml，37°C恒温箱温浴60分钟。弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上排干，如此重复洗板5次。依序每孔加底物 37°C避光。依序每孔加终止溶液50μl，。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。高灵敏度的动态散射比浊原理±s 表示，两组比较分析采用t检验； P0.05为差异有统计学意义。阳性率比较用………. 二、结 果 2.1血清抵抗素的检测结果 酶标仪分析得出的标准曲线见图1，糖尿病肾功能正常组（M1）与糖尿病肾功能早期损害组（M2）的血清抵抗素含量差异有显著统计学意义（P0.01，见表1）。三组血清抵抗素含量平均值的直观分布图见图2。 2.2糖尿病肾病早期诊断指标阳性率比较 离群值？ 健康者（M3）的血清抵抗素含量为27.1±6.5，包含95%健康者（M3）的范围视为本次试验血清抵抗素含量的正常值范围。下限是14.36，上限是40.63。各组研究对象的血清抵抗素含量与正常值范围比较，高于上限值为阳性结果。经计算，血清抵抗素阳性率为67.7%。又测得糖尿病肾功能早期损害组尿微量白蛋白阳性率为73.9%，血清胱抑素C阳性率60.9%。因此，肾脏功能早期损害的诊断指标阳性率由高到低依次为：尿微量白蛋白、血清抵抗素、血清胱抑素C。 图1:经过酶标仪分析得标准曲线 表1：各组抵抗素含量测定结果（n=89,(x±s） 组别 例数 血清抵抗素 （ng/ml） 糖尿病肾功能正常组（M1） 33 34.4±8.64 糖尿病肾脏早期损害组（M2） 31 43.57±8.47( 健康对照组(M3) 25 27.1±6.5 注：？与M1组比较，(P0.01 图2：各组抵抗素含量测定 三、讨 论 抵抗素是一种由脂肪细胞分泌的多肽类激素，有研究显示抵抗素是一种与肥胖、糖尿病有关的重要激素，其作用是对抗胰岛素，促使血糖水平升高、脂肪细胞增生而导致肥胖。新近研究显示，抵抗