专题29基因工程.pptx

专题29 基因工程;考点1 基因工程的工具与操作程序 一、基因工程的工具 1.限制酶 (1)存在:????原核生物????中。 (2)作用:????识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列????,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的????磷酸二酯键????断开。 (3)形成 末端类型? 2.DNA连接酶 (1)作用:将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 (2)种类; ;名称;二、基因工程的基本操作程序 1.目的基因的获取 (1)目的基因:主要指????编码蛋白质????的基因,也可以是一些具????调控????作用的因子。 (2)方法? [知识拓展]????(1)基因组文库与部分基因文库;(2)PCR技术 ①原理:DNA复制 ②需要条件:模板DNA、引物、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶(Taq 酶) ③过程:DNA受热变性解旋为单链、冷却后 RNA引物与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶作用下延伸合成互补链。 2.基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的:使目的基因????在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代????,同时使目的基因能够表达和发挥作用。 (2)基因表达载体的组成 ?;(3)构建过程 ? 3.将目的基因导入受体细胞 (1)受体细胞种类不同,导入方法不同;生物种类;? [易混辨析]????(1)目的基因的插入位点不是随意的,基因表达需要启动子与终止子的调控,目的基因应插入启动子与终止子之间的部位。 (2)基因工程操作过程中只有第三步(将目的基因导入受体细胞)没有碱基互补配对现象。 (3)农杆菌转化法原理:农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物,并将其Ti质粒上的T-DNA转移并整合到受体细胞染色体DNA上。;例1????(2016云南师大附中适应性月考,40)根据基因工程的有关知识,回答下列问题: (1)cDNA文库属于　　　????基因文库,其构建方法是:用某种生物发育的某个时期的　　　????反转录产生的cDNA片段,与　　　????连接后储存在一个受体菌群中。 (2)切割DNA分子的工具是　　　　　????,它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的????　　????断开,形成黏性末端或平末端。 (3)基因工程中所使用的DNA连接酶有两类。既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端的是　　　　　????DNA连接酶。 (4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是　　　????;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用????　　????处理细胞,使之成为感受态细胞,才能吸收DNA分子。 解析　(1)基因文库包括基因组文库和部分基因文库如cDNA文库。cDNA文库构建的方法是:用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的cDNA片段,与载体连接后储存在一个受体菌群中。(2)切割DNA分子的工具是限制酶,它作用的化学键是磷酸二酯键。限制酶切割DNA后形成黏性末端或平末端。(3)基因工程中所使用的DNA连接酶有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类,前者只可“缝合”黏性末端,后者既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末;端。(4)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法;如果受体细胞是大肠杆菌,需要用Ca2+处理细胞,使之成为感受态细胞,才能吸收DNA分子。 答案　(1)部分　mRNA　载体 (2)限制性核酸内切酶　磷酸二酯键 (3)T4 (4)农杆菌转化法　Ca2+ ;考点2 基因工程的应用与蛋白质工程 一、基因工程的应用 1.植物基因工程;2.动物基因工程;[易错易混]????(1)用基因工程的方法,使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系一般称为“工程菌”,如含有抗虫基因的土壤农杆菌菌株。而青霉素是诱变后的高产青霉菌产生的,不是通过基因工程改造的工程菌产生的。 (2)用基因工程生产的药品,从化学成分上分析都应该是蛋白质类。 (3)动物基因工程的实施主要是为了改善畜产品的品质,不是为了产生体型巨大的个体。 (4)并非所有个体都可作为乳腺生物反应器,制备乳腺生物反应器通常是针对雌性个体进行的操作。;5.流程: ? 6.蛋白质工程中通过对基因操作来实现对天然蛋白质改造的原因: (1)改造后的基因可以遗传给下一代,被改造的蛋白质无法遗传。 (2)对基因进行改造比对蛋白质进行直接改造要容易操作,难度要小得多。 例2????(2013课标Ⅰ,40,15分)阅读如下资料: 资料甲:科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“超级小鼠”;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。;回答下列问题: (1)资料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用　　　　????法。构建