活细胞工作站使用说明.PDFVIP

活细胞工作站使用说明 第一章 仪器开启（按下列顺序依次开启） 1. Nikon POWER 1 2. 汞灯荧光光源 2 3. 荧光光栅（shutter） 3 4. 透射光光源 4 5. 智能光栅控制系统(smart shutter controller)电源 5 （在后面） 6. 该系统分为三档：OPEN AUTO CLOSED，请调至AUTO 一档 6 7. CCD 相机变压器电源 7 （在后面） 8. CCD 相机电源 8 9. 显微镜电源 9 10. 加热装置电源 10 并设定合适的温度，默认37 摄氏度 11. 关闭气瓶出气阀门11，调节进气阀门12 使得进气气压表14 指 向5-10 MPa，再缓慢打开11，使得出气气压表13 指向0.7-0.8 MPa 位置即可。 12. 向载物台上的凹槽中加蒸馏水，但是不可没过出气孔15 13. 打开电脑，运行NIS-Elements 软件 第二章 仪器使用和数据导出 1. 首先在显微镜上找到合适的视野，提前设计好实验所需的荧光通 道，预期拍摄时间等参数，在显微镜中观察样本要选择EYE，在电脑 上预览和拍摄样本要选择L100 2. 显微镜触屏控制面板操作 A1：物镜倍率调节，其中 10,20,40 倍为普通物镜，100 倍为油镜 A4：稳焦系统（PFS）开关，详细的PFS 操作见下面，和下面提到的 PFS 开关功能相同，按任何一个都能打开PFS 系统 A5：同下面第6 条的MEMORY 按钮 B1：荧光光源滤光片选择 B2，B5，B8：用不上，不要按 D1，D5，D7，D8，E1：用不上，不要按 D3：荧光光源光栅（shutter），如果没有荧光，注意这个按钮 D6：通道切换，本设备需要调到EPI 通道 E3：透射光（即白光）光栅（shutter），如果没有白光，注意这个按 钮 E6：按亮后，开启面板的白光控制 E4：在开启E6 前提下，此按钮为白光开关 E5：在开启E6 前提下，此按钮为白光电压调节 3. 使用 按钮可以实现预览功能 4. 在ApplicationsDefine/Run Experiment 打开CCD 拍照程序 界面 5. 在Time 里设置拍摄时间，包括每两张图片的拍摄间隔时间 Interval和总拍摄时间Duration 6. 在XY position 中设定拍摄的视野，找到需要拍摄的视野后，点 击 记录位置并在Point Name 中划上钩 ，每次对视野位置和焦距 进行微调后，都应该点击 以保存位置，需要拍摄多个视野时重复 该操作即可，即 的数目就是你拍摄视野的数目 长时间拍摄需使用PFS 稳焦功能，首先要调好视野和焦距，然后点击 下方左图的ON 按钮（或者通过控制面板上的相应按钮打开），使用下 方右图PFS 装置微调焦距后，点击MEMORY 按钮，然后在软件的XY position 中的PFS 一栏点击 以保存PFS 位置。 7. 在Z Series 中设置Z 轴参数，如果只拍摄一个焦距面，则将Z Series 前面的钩点掉。设置多个焦平面时，分别用 和 按钮设定上下限，然后在Step 中输入焦距改变值即可 8. 在Lambda 中选择需要拍摄的通道，并将通道名称前面的钩划上 ，选几个通道就划上几个钩 附注：如果要调节某荧光通道的曝光时间，请先点击下列工具栏中相 应的荧光通道预览图像 然后点击左上面工具栏 的 按钮，或者点击菜单 ViewAcquisition controlsCoolSNAP HQ2 Settings，在新窗 口下图所示红色框子中调节合适的曝光时间，点击回车，关闭该窗口 然后右键点击下图中所调节的荧光通道（以10-40x DIC 为例），在下 拉菜单中选择Edit... 点击新出现窗口中的Assign current camera setting，然后点击 close 关闭窗口。 9. 将后面的Large Image 选项钩去掉 ，一般情况下不用 10. 在PathBrowse 设置数据存储路径，在File name 中设置文 件名字，注意文件后缀.nd2 不要改 11. 将上述拍摄程序设定好之后，点击该面板右下的