牦牛PRDX5基因的克隆测序及其在牦牛与犏牛睾丸中的表达差异.pdfVIP

江苏农业科学 2016年第44卷第8期 — 53 — 唐会会,郑玉才,王鹏非,等 牦牛PRDX5 基因的克隆测序及其在牦牛与犏牛睾丸中的表达差异[J] 江苏农业科学,206,44(8):53 56 do :0 5889/j ssn 002 302 206 08 03 牦牛PRDX5 基因的克隆测序 及其在牦牛与犏牛睾丸中的表达差异 唐会会,郑玉才,王鹏非,金素钰,黄 林 (西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都6004 ) 摘要:测定牦牛PRDX5基因序列,并比较其在牦牛和雄性不育犏牛睾丸组织中的表达差异,以探究该基因与犏牛 雄性不育的关系 从牦牛睾丸组织中提取总RNA,采用RT PCR技术克隆并测序获得牦牛PRDX5 基因的cDNA序 列;利用实时荧光定量RT PCR技术检测该基因在牦牛与犏牛睾丸组织中的表达情况 结果表明:克隆获得的牦牛 Prdx5序列长759bp,包含长660bp 的CDS区,该序列与普通牛基因相差4个碱基,序列同源性为99.47%,相差的4 个核苷酸导致推导的氨基酸序列存在3个氨基酸残基差异;Prdx5 在牦牛和犏牛睾丸组织中均有表达,在牦牛睾丸组 织中的表达量极显著高于犏牛(P 0.01),是犏牛睾丸组织中表达量的6倍,提示Prdx5在犏牛睾丸组织中低水平表 达可能与其雄性不育有关 关键词:牦牛;杂交雄性不育;PRDX5基因;基因表达;睾丸 中图分类号:Q785;S823.8 文献标志码:A 文章编号:1002 1302(2016)08 0053 04 过氧化物氧化还原酶(Peroxiredoxin,PRDX)家族是过氧 破坏 凋亡加速,最终导致哺乳动物雄性不育 12 据估计,约 1 2 3 1/4不育男性患者精液中ROS水平升高 13 14 化物酶超家族成员 ,广泛分布于原核及真核生物体内 PRDX5 能以 该家族蛋白利用其N 端保守的Cys残基催化还原细胞内活 高效的还原能力 保护精子免受氧化胁迫损害,因此Prdx51 性氧(ROS),从而保护细胞免受内外界环境中氧化胁迫带来 水平偏低可能与哺乳动物雄性不育有关 的损害,是一类巯基依赖性抗氧化蛋白酶 3 PRDX5 别称 牦牛(Bosgrunniens)是青藏高原特有牛种,其与普通牛 AOEB166 PMP20 AOPP,是哺乳动物 Prx 家族中唯一的非典 (Bostaurus)的杂交后代(犏牛)表现出F 至F 代雄性不育,1 3 4 型2 CysPrx ,主要分布于细胞的线粒体 溶酶体 细胞 这极大限制了犏牛杂种优势的固定,是牦牛杂交改良的一大 8 9 10 质 细胞核中 该酶不仅在免疫调控 细胞凋亡 信 难题 目前,有关犏牛雄性不育分子机制研究的相关基因如 11 16 17 18 19 20 号通路调节 等方面发挥作用,其功能主要在于还原细胞内 b Boule Dmrt7 Sycp3 Fabp5 Fabp9 Piwil1 21 22 及精子减数分裂阻滞 能量代谢 过量的ROS 过量的ROS会引起细胞及组织损伤,对动物精 Bvh L