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* 检查适应症及意义 外生殖器两性畸形 根据生殖器外观常难以正确决定性别的患者，通过性染色体的检查有助于做出明确诊断。 先天性多发性畸形和智力低下的患儿 染色体检查可发现有21-三体综合征等异常。 白血病及其它肿瘤患者 如：慢性粒细胞白血病：Ph染色体是其标记染色体，由9号和22号染色体部份片段相互易位形成的。Ph染色体的出现为慢性粒细胞白血病的确诊指标，治疗过程中Ph染色体的出现或消失，还可作为疗效和愈后的参考指标。 * 46，XY，t(7:21) * 47,XY,+21 * 47,XXY * 46,XY,t(9;22) * 46，XY, r（7） * * 4.每天实验前，在废物缸内套上塑料袋，加入半缸含有效氯1%次氯酸钠液，实验时将吸头、离心管丢入废液缸中浸泡。 5.所有试剂试验前充分融化，避免反复冻融。 6.每次PCR反应均应设立阴阳性对照。 注意事项 流式基本应用 * * 流式细胞术的概念 流式细胞术（Flow Cytometry, 简称FCM）是一种可以快速、准确、客观，并且能够同时检测快速直线流动状态中的单个微粒（通常是细胞）的多项特性，并加以定量的技术，同时可以对特定群体加以分选 研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征 * 流式细胞仪的检测范围 细胞结构 细胞大小 细胞颗粒度 细胞表面面积 核浆比例 DNA含量与细胞周期 RNA含量 蛋白质含量 细胞功能 细胞表面/胞浆/核的特异性抗原 细胞活性 细胞内细胞因子 酶活性 激素结合位点 细胞受体 * 散射光信号 Right Angle Light Detector ? Cell Complexity SSC Forward Light Detector ? Cell Surface Area FSC Incident Light Source 前向角散射光（FSC, Forward Scatter） 细胞相对大小及其表面积 侧向角散射光（SSC, Side Scatter） 细胞颗粒度及细胞内细胞器的相对复杂性 * 外周全血细胞散射光双参数点图（红细胞溶解后） * 荧光信号 使用荧光标记的单克隆抗体染色，做多色分析 荧光信号的强弱，反映了细胞抗原的表达含量 * 数据分析 数据显示: 直方图 ( Histogram ) 二维点图(Dot Plot) 等高线图(Contour Plot) 密度图 (Density) 三维图（3D Plot） * 流式的临床应用 淋巴细胞亚群分析 白血病和淋巴瘤的免疫分型 肿瘤的细胞周期和倍体分析 网织红细胞计数 细胞移植的免疫状态监测 干细胞计数 阵发性血红蛋白尿 HLA-B27检查 血小板功能及相关疾病 HIV免疫分型，CD4绝对计数 * 淋巴细胞亚群分析 使用经荧光素标记的特异单克隆抗体，进行多色染色，同时分析淋巴细胞膜上多种白细胞分化抗原（CD分子）的表达，可以将淋巴细胞亚群区分开，进行定性分析 各淋巴细胞亚群的百分含量 淋巴细胞亚群的绝对计数，进行定量分析 * 根据功能，淋巴细胞主要分为 B淋巴细胞（CD19+），与体液免疫有关 T淋巴细胞（CD3+），与细胞免疫有关 总T和总B可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病 NK细胞（CD3-CD16+56+），行使免疫监控功能，能够介导对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性作用。 * 根据CD4、CD8表达，T淋巴细胞又分为 T辅助/诱导细胞（CD3+CD4+），即 Th/Ti T抑制/细胞毒性细胞（CD3+CD8+）,即 Ts/Tc Th/Ts比值 可用于评价自身免疫失调、被怀疑是免疫失调或已知患有免疫缺陷的病人的免疫状态 * 临床意义 诊断原发性免疫缺陷病（如先天性无 r 球蛋白血症）或继发性免疫缺陷病（如AIDS） 造血干细胞移植后免疫重建（6个月NK?；9个月T、B?） Th/Ts?：机体免疫功能亢进：自身免疫性疾病，如SLE、类风湿性关节炎等（治疗有效恢复正常） Th/Ts?：机体免疫功能低下：AIDS、病毒感染、慢性活动性肝炎和活动性肝硬化、再障、结核、肿瘤等 * 临床意义 移植后动态免疫监测： 急排临床症状出现前1-5天，活化T和Th/Ts持续?，1.2预示急排； Th/Ts持续?表明可能感染，比值1.08，可能性大，0.2应停用免疫抑制剂； 实体肿瘤疗效和病人免疫状态观察 治疗前常伴T? 、Th/Ts?，放/化疗有效可恢复； 淋巴细胞免疫表型正常或治疗后能恢复正常者预后常较好； 探索疾病发病机理、进程和预后（炎症、肿瘤） * 淋巴细胞亚群双色分析 * 先天性无 r 球蛋白血症 * 淋巴细胞亚群双色分析 * H