微型电化学免疫传感器的研制及初步应用.pdfVIP

第 32 卷 分析化学（FENXI HUAXUE） 研究简报 第 7 期 2004 年 7 月 C1inese Journal of Analytical C1emistry 958 ~ 960 微型电化学免疫传感器的研制及初步应用 ， 陈汉忠l 2 蒋金书”l （l 中国农业大学动物医学院，北京 l00094） （2 广西大学动物科技学院，南宁 530005） 摘 要 利用微电子技术和电化学原理设计制作了一种微型电化学免疫传感器，应用恒电位法建立了该传 感器的实验条件。在设定的实验条件下测试，阳性血清的电流响应曲线与阴性血清的电流响应曲线具有明显 的离散度，并能检测不同类型的抗原抗体反应，不同抗原抗体之间没有交叉反应；测定一个样品用时不到 l 1， 仅用血清 l0 !L；传感器操作简便，微型小巧，便于携带，通过进一步的设计和条件优化，有望应用于临床和现 场抗原抗体反应的快速检测分析和诊断。 关键词 免疫传感器，电化学，抗原抗体反应，检测 1 引 言 电化学免疫传感器是一种将电化学分析方法与免疫学技术相结合而发展出来的具有快速、灵敏、选 择性高、操作简便等特点的生物传感器。这类传感器发展快，报道的应用研究也较多［l ~ 3］，但报道的电 化学免疫传感器或只适于测定某一种类的抗原抗体反应，或仪器设备复杂、昂贵，不适于临床和现场使 用。我们利用微电子技术和电化学原理，设计了微型反应池，利用性能稳定的石墨作电极基片，通过化 学修饰的方法使其表面获得活泼基团，将抗原或抗体共价键合在电极上，在液相中实现抗原抗体的反 应，采用恒电位法检测分析抗原抗体反应的性质。应用了几种不同的抗原抗体对微型电化学免疫传感 器适用性进行了实验。结果表明：该传感器用于不同抗原抗体反应的快速检测，特异性强，操作简便。 2 实验部分 2. 1 仪器与试剂 ［ ］ JDS-292 双显恒电位仪（上海雷磁新泾仪器有限公司）；传感器系统：工作电极制作 4 ~ 6 ，经过对多 种材料的筛选测试，最后选用 ! 0. 7 mm 石墨棒（Hanabis1 公司）。取 ! 0. 7 mm 石墨棒 l cm，将其一端 与一根细导线相焊接，然后导入毛细玻璃管内。外留部分，其表观几何面积为 ll. 33 mm2 ，用密封胶封 固，导线从另一端引出；Pt 电极制作：取一片 8 mm X 0. 7 mm 铂片，一端与导线焊接，将其导入毛细玻璃 管内。外留部分表观几何面积为 8 mm2 ，迅速用火焰熔封毛细管端口，另一端引出导线，管口用密封胶 封固；参比电极用 232 型 Ag / AgCl 参比电极（上海康宁电光技术有限公司）改装。600 !L 样品池，用玻 璃和聚苯乙烯材料制作。 EDC［l-乙基-3（- 3-二甲氨基）碳二亚胺盐酸盐］（北京化学试剂公司）；NHS（ N-羧基硫代琥珀酰亚 胺）（北京化学试剂公司）；兔 IgG、羊抗兔 IgG 血清、羊抗人 IgG 血清；羊 IgG、兔抗羊 IgG 血清、兔抗牛 IgG 血清（北京鼎国生物技术发展中心）；ND（鸡新城疫病毒病）抗原、ND 阳性血清、鸡阴性血清（ 中国 兽医监察所）；牛血清和鸡血清（自制）；其