植物组织培养技术刘弘6-3课件教学.pptVIP

3.心叶组织培养 (1)取材、消毒与接种　取茎端生长锥，用75％酒精将呈卷筒状的幼叶浸泡消毒30s，无菌水冲洗2次后，在无菌条件下剥除外部叶鞘，留下直径为0.5cm的心叶，横切成1～2mm的薄片，接种到培养基中。(2)初代培养　心叶愈伤组织诱导培养基可采用MS＋2,4-D3.5mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂0.7％。 小贴士.eps 3.心叶组织培养 线.eps (3)继代增殖扩繁　将诱导出的丛生芽苗转入增殖培养基上增殖扩繁，增殖培养基为改良MS(即去掉维生素的MS)+6-BA5.0mg/L＋NAA0.05mg/L＋蔗糖30g/L，并随着继代次数的增加，添加6-BA与NAA的浓度逐渐下降，在增殖培养基中含有较低浓度的生长素与细胞分裂素，可以培育健壮的丛生芽苗。(4)生根培养及驯化移栽　选取生长健壮的丛芽苗切割成单苗转接到生根培养基上诱导生根，待根系发育良好，即可进行驯化移栽。1.砧木种子处理方法正确，苗龄合适。 3.心叶组织培养 2.茎尖剥离方法正确，大小合适。3.微嫁接方法正确，成活率高。1.材料与试剂2.仪器与用具1.砧木准备(1)砧木种子消毒　选取充实饱满、无病虫的枳壳、枳橙等种子，用自来水冲洗干净，再用纱布包好，放入45℃温水中预泡5min，再用55℃热水浸泡50min。 小贴士.eps 3.心叶组织培养 线.eps (2)砧木苗培养　在超净工作台上，用手术刀或镊子剥去种皮，播种于MS固体培养基上，每支试管播2～3颗种子。2.接穗准备1)直接从田间生长旺盛的植株嫩梢上剪取1.5～3.0cm长的芽梢，用自来水冲洗片刻。 3.心叶组织培养 小贴士.eps 3.心叶组织培养 线.eps 2)取组织培养的无菌柑橘试管苗作接穗。3.微芽嫁接 3.心叶组织培养 小贴士.eps 3.心叶组织培养 线.eps 4.嫁接苗培养5.嫁接苗驯化移栽6.病毒检测 3.心叶组织培养 注意事项.eps 3.心叶组织培养 表6-5　柑橘茎尖微嫁接实训考核方案 6.4.1　马铃薯脱毒与快繁  馋死 PPT研究院 POWERPOINT ACADEMY 1.草莓脱毒苗培养 线.eps (2)热处理结合茎尖培养脱毒　将盆栽草莓苗或试管苗置于高温热处理箱内，白天升温至40℃处理16h，夜间温度降至35℃左右处理8h，箱内湿度为60％～80％，变温处理35d。 1.草莓脱毒苗培养 小贴士.eps 1.草莓脱毒苗培养 线.eps 1.草莓脱毒苗培养 小贴士.eps 1.草莓脱毒苗培养 线.eps (3)花药培养脱毒　1974年日本大泽胜次等首先发现草莓花药培养可以脱除病毒。 1.草莓脱毒苗培养 小贴士.eps 1.草莓脱毒苗培养 线.eps (4)病毒检测　目前草莓病毒最常用的检测方法是指示植物小叶嫁接鉴定法。 1.草莓脱毒苗培养 小贴士.eps 1.草莓脱毒苗培养 线.eps 1.草莓脱毒苗培养 表6-4　几种草莓病毒的指示植物及症状表现 2.草莓离体快繁 (1)外植体取材、消毒与接种　草莓离体快繁常用母株上新抽出的匍匐茎作为外植体，以每年7～8月份取材最为适宜，此时匍匐茎发生最旺盛。 小贴士.eps 2.草莓离体快繁 线.eps (2)初代培养　草莓茎尖培养可采用MS＋6-BA0.5mg/L＋GA30.1mg/L＋IBA0.2mg/L培养基，接种后培养1～2个月，茎尖形成愈伤组织并分化形成丛生芽。(3)继代增殖扩繁　将丛生芽切割成有3～4个芽的芽丛转入MS＋6-BA0.5～1.0mg/L的增殖培养基中进行继代培养，经过3～4周的培养可再次继代扩繁。 2.草莓离体快繁 小贴士.eps 2.草莓离体快繁 线.eps (4)生根培养　将芽丛切割成单芽苗转接到1/2MS＋IBA0.2～1.0mg/L或NAA0.5～1.0mg/L的生根培养基中诱导生根。 2.草莓离体快繁 小贴士.eps 2.草莓离体快繁 线.eps (5)驯化移栽　当试管苗根长至2～3cm时，打开瓶盖或封口膜，置于温室或大棚中炼苗3～4d。 6.3.7　树莓离体快繁 1.外植体取材、消毒与接种2.初代培养3.继代增殖扩繁4.生根培养5.驯化移栽 1.外植体取材、消毒与接种  2.初代培养  3.继代增殖扩繁  4.生根培养  5.驯化移栽  6.3.8　甘蔗脱毒与快繁 1.甘蔗茎尖培养脱毒与快繁2.热处理结合茎尖培养脱除病菌3.心叶组织培养 1.甘蔗茎尖培养脱毒与快繁 (1)外植体取材、消毒与接种　在甘蔗旺盛生长阶段取材，适于脱毒培养的外植体材料有甘蔗腋芽和茎端生长锥。 小贴士.eps 1.甘蔗茎尖培养脱毒与快繁 线.eps 1.甘蔗茎尖培养脱毒与快繁 小贴士.eps 1.甘蔗茎尖培养脱毒与快繁 线.eps (2)初代培养　诱导茎尖产生丛生芽的培养