植物组织培养技术刘弘4课件教学.pptVIP

4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 线.eps 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 P101.TIF 1.什么是种质？种质资源的意义和作用有哪些？2.种质离体保存与传统的种质资源保存方式有何不同？3.植物种质资源限制生长保存有哪些方法? 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 4.什么是超低温保存？其原理是什么？请简述操作程序。 馋死 PPT研究院 POWERPOINT ACADEMY 3.2.2　脱毒苗保存与繁育 注意事项.eps 3.2.2　脱毒苗保存与繁育 表3-6　脱毒苗的酶联免疫吸附法检测实训考核方案 知识链接.eps 3.2.2　脱毒苗保存与繁育 线.eps 3.2.2　脱毒苗保存与繁育 p90.TIF 3.2.2　脱毒苗保存与繁育 p90A.TIF 1.名词解释：脱毒苗、指示植物、抗血清。 3.2.2　脱毒苗保存与繁育 2.植物脱毒的主要方法有哪些？其原理是什么？3.微茎尖嫁接技术脱毒的程序怎样？4.目前鉴定脱毒苗的方法有哪些？各有何特点？5.简述香石竹热处理和茎尖脱毒培养操作流程。6.简述草莓花药培养操作流程。7.脱毒苗指示植物鉴定有哪些方法？8.血清学鉴定的原理是什么？简述间接法酶联免疫吸附检测操作流程。9.脱毒苗保存有哪些方法？10.快速扩繁脱毒苗有哪些方法？11.脱毒苗繁育良种体系有哪几个阶段？ 3.2.2　脱毒苗保存与繁育 xx.tif 4.1.1　低温保存 小贴士.eps 4.1.1　低温保存 线.eps 4.1.2　高渗透压保存 小贴士.eps 4.1.2　高渗透压保存 线.eps 4.1.3　生长抑制剂保存  4.1.4　降低氧分压保存 小贴士.eps 4.1.4　降低氧分压保存 线.eps 4.1.5　干燥保存法 小贴士.eps 4.1.5　干燥保存法 线.eps 4.2.1　超低温保存的原理  4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 图4-1　植物离体材料超低温保存的基本程序 1.材料选择 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 小贴士.eps 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 线.eps 2.材料预处理(1)低温锻炼　将离体培养物置于一定的低温环境中，使其接受低温锻炼，逐渐提高抗寒能力。(2)加入冷冻保护剂　冷冻保护剂在水溶液中产生强烈的水合作用，提高水溶液的黏稠性，从而降低细胞内盐的浓度和冰晶的形成，使细胞免受冻害。 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 小贴士.eps 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 线.eps 3.冷冻处理(1)慢冻法　先以1～5℃/min的速度降温。(2)快冻法　对预处理过的材料以100～1000℃/min的速度降温，直至-196℃冷冻保存。(3)分步冷冻法　将植物材料放入液氮前，先经几个阶段的预冻处理，如-20℃、、-40℃、-50℃、-70℃，然后再转入-196℃液氮中。 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 (4)干冻法　将样品在高含量渗透性化合物(甘油、糖类物质)培养基上培养数小时至数天后，经硅胶、无菌空气干燥脱水数小时，再用藻酸盐包埋样品进一步干燥，然后投入液氮中；或者用冷冻保护剂处理后吸去表面水分，密封于金箔中进行慢冻。 小贴士.eps 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 线.eps 4.解冻与洗涤解冻是将液氮中保存的材料取出，使其融化，以便恢复培养。解冻的速度是解冻技术的关键。解冻可分为快速解冻和慢速解冻两种方法。(1)快速解冻法　将冷冻的材料从液氮中取出后，放入35～40℃(该温度下解冻速度一般为500～700℃/min)温水浴中解冻。(2)慢速解冻法　将冷冻的材料从液氮中取出后，置于0℃或2～3℃的低温下缓慢融化。 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 小贴士.eps 解冻速度的选择应参考冷冻速度。另外，不同植物及不同类型材料所适宜的化冻时间也有所差异，应通过反复试验，摸索最佳解冻方法。 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 线.eps 5.再培养与鉴定评价1.材料与试剂2.仪器与用具1.培养基制备(1)柑橘试管苗保存培养基：1/4MS＋1.0mg/L多效唑＋20g/L蔗糖＋6g/L琼脂。(2)葡萄试管苗保存培养基：1/4MS＋IBA 0.2mg/L＋2.0mg/L多效唑＋20g/L蔗糖＋6g/L琼脂或GS＋IBA 0.2mg/L＋2.0mg/L多效唑＋6g/L琼脂。 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 2.试管苗转接3.保存培养4.观察记载及结果统计 注意事项.eps 4.2.2　超低温保存的基本程序及方法 表4-1　柑橘、葡萄试管苗的生长抑制剂保存实训考核方案 1.材料与试剂2.仪器与用具1.培养基制备2.外植体取材、消毒及预培养 4.2.2　超低