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分析黑果枸杞对辐小鼠造血系统的保护功能 　　电离辐射已成为威胁人类健康的重要因素,与水污染、空气污染、噪声污染一起被称为四大污染。辐射对机体的几乎所有组织器官都有损伤,而造血系统、生殖系统、消化系统都是辐射敏感的靶器官。目前上市的抗辐射药物大多毒性大,副作用多,作用靶点单一。美国陆军研究所研制的第一个FDA批准上市的抗辐射药物氨磷汀能显著降低放疗后正常细胞大量死亡的现象,但由于低血压、恶心、呕吐等不良反应导致其使用受限。因此研究开发安全、有效的抗辐射药物有积极的意义。天然药物毒性低、作用广泛,能对多个器官、靶点产生作用,符合辐射损伤的特点。因此从天然药物中寻找高效低毒的辐射防护药物已成为研究热点。黑果枸杞Lyciumruthenicum Murr.为茄科枸杞属多棘刺灌木,主要分布于我国西北地区,生长在气候干燥、海拔高的盆地沙漠地带,是一种珍贵的药食两用植物,含大量原花青素、花青素、多糖等。已有研究证明了黑果枸杞具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、清除自由基等作用。但关于黑果枸杞的抗辐射作用尚未见报道。本文研究了黑果枸杞对辐射小鼠造血系统的保护作用,并阐述其机理以期为其开发提供理论依据。 　　1 材料与仪器 　　1.1 实验动物 8周龄SPF级昆明种小鼠,雌雄各半,体质量(25plusmn;2)g,购自甘肃中医学院,生产许可证号:SCXK(甘)2011-0001。分笼饲养于青海大学医学院实验动物中心。饲养条件:光照明暗12h交替,自由饮水,温度:(23plusmn;2)℃,适应性喂养3d,每笼10只群养。 　　1.2 药物与试剂 黑果枸杞购自青海九康中藏药有限公司,经青海大学医学院中药教研室袁明教授鉴定为茄科植物黑果枸杞Lyciumruthenicum Murr.的干燥成熟果实。氨磷汀(批号:130306,天津中瑞药业股份有限公司);小鼠半胱氨酸蛋白酶3酶联免疫检测试剂盒(Caspase-3,批号60325M);小鼠半胱氨酸蛋白酶6酶联免疫检测试剂盒(Caspase-6,批号60328M)均购自北京瑞格博科技发展有限公司;血液细胞分析仪用溶血剂(批号:2013111101);三分类探头清洁液(批号:2013112101);血液细胞分析仪用稀释液(批号:2013110701)均购自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司;山羊抗小鼠p-P53多克隆抗体(1∶200,SantaCruz公司sc-18078)。 　　1.3 主要仪器 医用电子直线加速器(美国VaRian,23EX);UV-2550型紫外分光光度计(日本岛津公司);TGL-16B型高速冷冻离心机、KA-1000型台式离心机(上海安亭科学仪器厂);RE-52A旋转蒸发仪、SHZ-ⅢD型循环水真空泵(上海亚荣生化仪器厂);DK-2000-ⅢL型电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司);KQ-250DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);RT-2100C酶标仪(深圳雷杜生命科学股份有限公司);DRT-2N型电热套(郑州大城科工贸有限公司);YDS-30东亚液氮容器(乐山市东亚机电工贸有限公司);BT224S电子天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公司);XW-80A漩涡混合器(上海医大仪器厂);BC-2300准全自动三分群血液细胞分析仪(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司);Olympusbx51显微镜(日本Olympus公司)。 　　2 方法 　　2.1 药物提取 　　采用浸渍法,溶剂为水,时间4h,液料比为1/20,温度70℃。称取黑果枸杞300g,加入6000mL蒸馏水,70 ℃恒温水浴锅,避光浸泡4h。旋转蒸发仪70℃回收溶剂,过滤,定容到750mL(终浓度为400mg/mL),4℃避光保存备用。 　　2.2 动物分组 　　SPF级昆明种雄性小鼠180只,随机分为6组:正常对照组、辐射模型组、氨磷汀(150mg/kg)阳性对照组及黑果枸杞高(8g/kg)、中(4g/kg)、低(2g/kg)剂量组,每组30只。分别于辐射后3、7、17d每组随机取10只小鼠后进行实验。黑果枸杞各组每日灌胃给予相应剂量药,正常对照组及模型组灌胃等体积生理盐水,灌胃体积为20mL/kg,连续14d后进行X线照射,氨磷汀组于照射前30min以150mg/kg腹腔注射氨磷汀溶液。除正常对照组外其他各组小鼠单独固定在自制模具中,采用美国VaRian23EX医用电子直线加速器X-Rays全身一次性照射,照射剂量5Gy,吸收剂量率300CGy/min,照射时间:100s,视野40times;40cm,源皮距100cm。分别于辐射后第3、7、14天进行实验。 　　2.3 指标检测