第1章生物学常用仪器使用.ppt.pptVIP

生物学实用技术 教 学 内 容 第一章 常用生物学仪器使用 第一节 显微镜技术 第二节 其他常用仪器的使用与保养 第一节 显微镜技术 油倍镜的观察:油镜比较精密,价格昂贵,在使用上要注意轻拿轻放;提升镜筒(降载物台),将物镜转离光轴,在盖玻片滴一滴香柏油,把光阑升到最大,换上油镜,小心调节粗准焦螺旋,使油镜慢慢地下降(或载物台上升),从侧面仔细观察油镜下端与标本之间距离,当油镜的下端开始触及油滴时即停止下降(或上升)。从目镜观察,调节细准焦螺旋,直至看清标本物像。要清洁;油镜用擦镜纸蘸少许二甲苯擦试２～３次; 瞳 距 调 节 孔径光栏调节 荧光显微镜在光学显微镜中占重要地位。它分辨率高，能直接显示细胞内的生物化学成分，彩色效果好；易进行定性定量分析，特别是标记荧光抗体的特异性示踪技术。 1.利用紫外光照射，使标本内荧光物质转化为各种不同颜色荧光后，来观察标本内某物质性质和位置。 2.装置特点 含紫外光高的照明装置：常用高压汞灯或弧光灯产生光源； 滤光镜系列：吸热滤光镜、激发滤光镜、阻挡滤光镜等； 3.根据光路分为： 透射荧光显微镜和落射荧光显微镜； 2.透射电子显微镜的主要特点 分辨本领高 人眼：0.1mm光镜：0.2μm 电镜可达2A0 （1μm=1000A0） 用电子束为光源样品要求很薄，一般500A（0.05μm）即石蜡切片5μm百分之一; 用电磁场作透镜 电磁影响电子的运动轨迹； 通过改变电流强度来调查电镜的高宽，焦距在荧光屏上成像观察面积小，局限; （三 ）超薄切片的制作技术 取材 1mm 小，快，避免挤压 固定 Ph为7.4 2—3%戊二醛 冰箱中保存 →1% 锇酸后固定（PH7.4） 1-2h 脱水 梯度酒精 丙酮 浸泡 环氧树脂 618 、812包埋 修组织块 光学定位及切片，削成锥形小塔状， 顶面积1mm见方，切厚1μ半薄切片→定位 超薄切片→铜网上 染色 用重金属盐（柠檬酸铅，醋酸铀等） 第二节 其他常用仪器的使用与保养 (一)电热干燥箱的原理与构造 由两部分组成:一部分是加热、保温装置,是电热干燥箱的主体;另一部分是温度控制系统。 1.主体 电热干燥箱的主体框架是由各种型号的钢及薄钢板构成。箱内有样品室和加热室。 2.温度控制器 由感温探头(热敏电阻)、控温电桥、放大电路、控温继电器等几部分组成。 (二)电热干燥箱的使用方法 放入样品,关好箱门 接通电源 设置温度和时间参数 开启开关,有鼓风机者,可根据需要开启鼓风机开关； (一)恒温培养箱的原理与构造 原理和构造与电热干燥箱基本相同,只是温度范围不同。电热干燥箱温度范围一般在50～300℃,而恒温培养箱的温度范围在20～60℃。 (二)恒温培养箱使用方法 (一)原理与构造 1.是利用离心力对混合溶液进行快速分离及沉淀的一种实验室常备仪器。 2.离心机种类很多,有台式、高速、超高速离心机等 ； (二)使用方法及注意事项 1.将离心机置于平稳台面上,调平、放稳,有吸盘或吸脚者都要吸牢台面; 2.将对称位置的离心管调平衡; 3.检查调速装置是否处于零位,容器室盖是否盖紧,地线是否接地; 4.接通电源,打开开关。设定转速和时间 5.运转中严禁移动位置和开盖; 6.离心完毕,将调速装置回到零位,关闭电源开关。待其停稳后方可开盖,取出离心管。 不同物质具有特征吸收光谱。分光光度法不仅适应于可见光区，同时还可扩展至紫外光区及红外光区 。 （一）使用规则 (1)接通电源，仪器自动进入初始化。初始化约需时10min，当显示器指示××nm时，表明仪器完成初始化程序，可进入检测状态。 (2)输入参数，选择相应比色杯依次放入比色皿架内，关上比色池盖，自动调零。 (3)试样槽依次移至样品位置，待数据显示稳定后按“START/STOP”键，打印机自动打印所测数据，重复上述步骤，直到所有样品检测完毕。 (4)检测结束后及时取出比色杯，并洗净放回原处，同时关上电源，做好使用情况登记。 （二）注意事项 通电预热 ；比色皿保持清洁； （一）概述 1.电泳：带电质点在电场中移动的现象。 2.影响电泳速度的因素 电场强度、溶液的pH值、溶液离子强度、电渗等。 3.分类 按支持介质不同可分为：纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、琼脂凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳 等 按支持介质形状不同可分为：薄层电泳、水平电泳、柱电泳、垂直电泳等； 按使用目的命名：核酸电泳、血清蛋白电泳、制备电泳、DNA定序电泳等； （二）电泳仪的使用方法 将电泳槽两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反； 接通电