食品中毒素的检测【培训课件】.pptVIP

（三）棉籽油中棉酚含量的检测 我国种植的棉花属于陆地棉及草棉,棉籽中常含有0.15%~2.8%游离棉酚.冷榨棉籽油时,大部分棉酚转入棉籽油中,可高达1%~3%.食用冷榨棉籽油或毛棉籽油,极易引起中毒.棉籽油中含有0.02%游离棉酚对动物健康无影响,0.05%以上时对动物有危害,国标规定,棉籽油中游离棉酚=0.02％. 紫外分光光度法 原理:样品中游离棉酚经用丙酮提取后,在378nm有最大吸收，其吸收值与棉酚量在一定范围内成正比，与标准系列比较定量。 试剂与仪器: 仪器：紫外分光光度计 试剂:a.丙酮70％：将350mL丙酮加水至500mLb.配制棉酚标准使用液：吸取棉酚标准溶液5.0ｍＬ，置于100ｍＬ容量瓶中，加70％丙酮稀释至刻度，此溶液每毫升相当于50.0μg棉酚。 主要分析步骤提取：称取1.00ｇ三级棉籽油置于100ｍＬ具塞锥形瓶中，加入20.0ｍＬ70％丙酮,并加入玻璃珠３～５粒，在电动振荡器上振荡３０ｍｉｎ，然后在冰箱中放置过夜.上清液，过滤。 标准系列制备：吸取 0.0 、0.1、0.2 、0.3、 0.4 、0.5、 0.6 ｍＬ棉酚标准使用液（相当于5,10,15,20,25,30μg棉酚）,分别置于１０ｍＬ具塞试管中，各加70％丙酮至10ｍＬ，密塞混匀，静置10min。测定吸光值:取滤液及标准溶液于1cm玻璃比色杯中，以70％丙酮溶液调节零点，于378nm波长处测吸光度,绘制标准曲线比较。 结果计算 X= 式中 X---试样中游离酚棉的含量，g/100g m1---样品管中游离酚棉的质量,μg m2---试样质量,g. 苯胺法 1?仪器：分光光度计2?试剂：苯胺（A.R.）?丙酮70%：同上；棉酚标准溶液：同上；乙醇（95%） 实验步骤： 称取1.0ｇ试样置于150ｍＬ具塞锥形瓶中，加入20mL丙酮,玻璃珠３～５粒,剧烈震动1小时，在冰箱中过夜,过滤，滤液备用.在两支25mL具塞比色管中，各加入2mL上述滤液，以甲管为试样管，乙管为对照管，另吸取、0.0 、0.1、0.2 、 0.4 、 0.6、 0.8、1.0ｍＬ棉酚标准使用液（相当于0.0、5.0、10.0、20.0、40.0、50.0μg棉酚）各两份，分别置于甲乙两组25mL具塞比色管中，各管均加入丙酮至2mL，甲组标准管与试样管甲管各加入3mL苯胺，在80度水浴中加热15min,取出冷至室温，各加入乙醇至25mL，乙组标准管与试样管乙管各加入乙醇至25mL。两组溶液再加乙醇后均放15min，以甲组的零管为试剂空白，以一组的零管为溶剂空白，用1cm比色杯，在波长445nm处，测定两组的吸光度，以两组对应的吸光度之差，与相应标准浓度绘制标准曲线，以试样甲管与乙管的吸光度之差从标准曲线从标准曲线查出棉酚含量。 计算结果: X= 式中 X---试样中游离酚棉的含量,g/100g m1---样品管中游离酚棉的质量,μg m2---试样质量，g. 实验要求:精密度要求在重复条件下获得的两次独立测定的结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%. （四）、马铃薯毒素的检测 龙葵碱对胃肠道粘膜有较强刺激性和腐蚀性，对中枢神经有麻痹作用，对红细胞有溶血作用。其中毒作用主要是通过抑制胆碱酯酶的活性而引起的。 测定龙葵碱含量的方法主要是比色法 原理 龙葵碱不溶于水、乙醚、氯仿，但能溶于乙醇。 龙葵碱在稀硫酸中与甲醛溶液作用生成橙红色化合物，与520nm波长下比色测定。 仪器与试剂 A 仪器：匀浆机、离心机、旋转蒸发器、 721分光光度计 B 试剂 ：龙葵碱标准溶液（精确称取0.1000g龙葵碱，以1%硫酸溶液溶解并定容至100ml，此溶液中龙葵碱浓度为1mg/mL） 实验步骤 A 样品提取 a 称取捣碎的马铃薯样品20g于匀浆器中，加100mL 95%乙醇，匀浆3min。 b 将匀浆离心10min(4000 r/min)取上清液，残渣用20mL乙醇洗涤两次，合并上清液。将上清液浓缩至干。用5%硫酸溶液溶解残渣，过滤后将滤液用氨水调至中性，再加1~2滴浓氨水调PH至10~10.4，在80C水浴中加热5min，冷却后至冰箱中过夜，目的是使龙葵碱沉淀完全。 C 离心弃去上清液，以1%氨水洗至无色透明，将残渣用1%硫酸溶液溶解并定容至10mL，此为龙胆碱提取液。 B标准曲线制作 用龙葵碱储藏液配成100ug/mL浓度的标准使用液，分别吸取0mL、0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL龙葵碱标准使用液相当于0ug、10ug、20ug、30ug、40ug、50u