人乳头状瘤病毒(广谱)检测试剂盒(原位杂交).docVIP

人乳头状瘤病毒（广谱）检测试剂盒（原位杂交） （操作之前请详细阅读此说明书） 检测原理和意义 提供的材料和试剂成 份 保存方法 提 供 量 20人份 50人份 HPV 广谱杂交液 -20℃ 500ul 625ulx2 2 杂交增强液（100）ml 60ml 3 一抗 4℃ 1ml 2.5ml 4 二抗 4℃ 1ml 2.5ml 5 HRP聚合物 4℃ 1ml 2.5ml 6 DAB底物 4℃ 1ml 2.5ml 7 DAB 4℃ 20ul 50ul 8 18X18mm盖玻片 4℃/室温 20片 50片 9 湿盒增效液 4℃/室温 30ml 30ml （注意：HPV广谱杂交液请 -20℃保存） 用户自备材料和试剂 1. 原位杂交加热器（泰普编号：M10061） 8. 湿盒2个 2. 微波炉 . 二甲苯 3. 37℃培养箱 . 酒精 4. 光学显微镜 . PBS pH 7.6 5. 移液器 1. 苏木 6. 计时器 1. 氨水 7. 玻片染色缸染色架 实验前需配试剂 A、1X杂交增强液 取适量100X蒸馏水，并将此1X存放4℃备用。DAB显色液 依据需要配制DAB液以可覆盖整个组织的量为宜 操作步骤 1．切片处理将组织粘附在APES处理的载玻片上切片于60烘烤60分钟。脱蜡 溶液次数×时间（分）二甲苯3 × 10 100%酒精× 3 95％酒精 1 x 3 80%酒精× 3 蒸馏水 1 x 3 （注意：二甲苯，应相应延长脱蜡时间，以保证脱蜡完全将切片放入盛有1X的容器里，微波高火状态煮分钟。（）杂交每张切片滴加 约25 ul，根据组织大小增、减量 ，并加盖玻片放置于95℃原位杂交加热器变性钟放入中，37℃下孵育-16 小时＜预温）浸泡切片在.1 小心擦去组织周围液体，滴加一抗 ul，根据组织大小增、减量 ，37℃，水湿盒中孵育30分钟；PBS浸泡3x2分钟（轻微振荡容器）； .2 小心擦去组织周围液体，滴加二抗 ul，根据组织大小增、减量 ，室温，水湿盒中孵育20分钟；室温PBS浸泡3x2分钟 轻微振荡容器 ； .3 小心擦去组织周围液体，滴加HRP聚合物 ul，根据组织大小增、减量 ，室温，水湿盒中孵育30分钟；室温PBS浸泡3x2分钟 轻微振荡容器 。 .4 小心擦去组织周围液体，滴加DAB显色液 ul，根据组织大小增、减量 ，室温，水湿盒中孵育约10分钟（不同样本的显色时间可能有所差别，建议镜下观察显色过程）室温PBS浸泡3x2分钟 轻微振荡容器 。 .5 自来水冲洗，苏木精复染（可用分化及氨水返蓝）。梯度酒精脱水，中性树胶封片。 本试剂保质期为12个月。，请及时与泰普客户服务中心联系PBS（37℃）浸泡 3X2′ 15 加二抗 室温，20′ 16 PBS浸泡 3X2′ 17 加HRP聚合物 室温，30′ 18 PBS浸泡 3X2′ 19 DAB显色 室温，2-10′ 20 PBS浸泡 3X2′ 21 自来水冲洗 1′ 22 复染，脱水，封片 常规 规格： 20 人份50 人份 产品型号： S30292 S30293 2 泰普生物TRIPLEX 人乳头状瘤病毒（广谱）检测试剂盒