生化答案第1章 蛋白质-1.pptVIP

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蛋白质化学 第一节 蛋白质的分类 第二节 蛋白质的组成单位 第三节 多肽 第四节 蛋白质的结构 第五节 蛋白质结构与功能的关系 第六节 蛋白质的性质与分离、分析技术 蛋白质(Protein)的元素组成:C 50-55%、H 6-8%、O 20-23%、N 15-18%、S 0-4%,有些蛋白质还含有P、Fe、Cu、Mn、Zn、Se等。 各种蛋白质的氮含量皆近于16%。1克氮相当于6.25克蛋白质,通常作为测定样品中蛋白质含量的依据。 凯氏(Kjeldahl)定氮法: 蛋白质的分类 一、根据分子形状分类 二、根据分子组成分类 三、根据功能分类 二、根据分子组成分类 1. 简单蛋白质(simple protein) 又称为单纯蛋白质; 这类蛋白质只含由?-氨基酸组成的肽链,不含其它成分。 2. 结合蛋白质(conjugated protein) 由简单蛋白质和非蛋白质(辅基)两部分组成。 包括:核蛋白、糖蛋白(或蛋白聚糖)、脂蛋白、色蛋白和磷蛋白。 三、根据功能分类 酶 调节蛋白 贮存蛋白 转运蛋白 运动蛋白 第二节 蛋白质的组成单位—— 氨基酸(amino acid , AA) 氨基酸 一、氨基酸的结构 二、氨基酸的分类 三、氨基酸的重要理化性质 1. 结构(20种基本氨基酸) α-氨基酸:19种 α_亚氨基酸:1种 要求:掌握20种AA的三字母代号; 20种AA的结构特征。 记20种AA的口诀 Met Trp Lys Val Ile Leu Phe Thr 假 设 来 写 一 两 本 书 二、氨基酸的分类 (一)蛋白质中常见的氨基酸 (二)修饰氨基酸 (三)非蛋白质氨基酸 非极性R基氨基酸 Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Met、 Pro、Trp (共有8种)。 有时将Gly也归入非极性类。 (1)极性不带电荷(6+1种):Gly、Ser、Thr、Cys、Gln、Asn、Tyr; (2)极性带负电荷(2种): Asp、Glu; (3)极性带正电荷(3种): His、Lys、Arg 根据侧链R基团的酸碱性,又可分为: 中性氨基酸:一氨基一羧基氨基酸 酸性氨基酸: Asp、Glu 碱性氨基酸: His、Lys、Arg (二)修饰氨基酸—稀有氨基酸 (无遗传密码,蛋白质合成后经酶的催化而成) 4-羟脯氨酸 (三)非蛋白质氨基酸 不存在于蛋白质中的游离氨基酸 例如鸟氨酸(Orn) 瓜氨酸(Cit) 三、氨基酸的重要理化性质 (一)一般物理性质 (二)氨基酸的解离性质 (三)氨基酸的化学性质 (一)一般物理性质 1. AA的吸收光谱 Trp、Tyr、Phe能吸收紫外光(依吸收能力从大到小排序),λ=280nm。 2. AA的溶解度 在水中(Cys)2、Tyr、Asp、Glu等,溶解度小。乙醇能将AA从溶液中析出。 3. 旋光性( Gly无旋光性。) 2. 氨基酸等电点(isoelectric point) 概念:当溶液为某一pH时,氨基酸分子主要以两性离子的形式存在,能够解离成正离子和负离子的数目和趋势相等,即净电荷为零,这一pH即为氨基酸的等电点,简称pI。 pI值为两性离子两边pK的平均值。 例如: Ala的pK1 = 2.34,pK2 = 9.69,所以pI=6.02; Asp的pK1 = 1.88,pK2 = 3.65,所以pI=2.77; Lys的pK2 = 8.95,pK3 = 10.53,所以pI=9.74。 4. 等电点的用途 (1)电泳:pH=pI AA±=0 pH<pI AA+ 向负极移动 pH>pI AA- 向正极移动 (2)AA的制备:AA处于等电点时溶解度最小。 如:在工业上利用Glu的pI为3.22来制备Glu。 (三)AA的化学性质 1. 与茚三酮反应 2. 与甲醛反应 3. 与2,4-二硝基氟苯反应 4. 与丹磺酰氯反应 5. 与异硫氰酸苯酯反应 1. 与茚三酮反应(α—氨基和α—羧基共同参与的反应) (1)α-氨基酸:与茚三酮反应产生蓝紫色物质。 (2)脯氨酸(Pro)和羟脯氨酸(Hyp)与茚三酮反应产生黄色物质。 α-氨基酸与茚三酮反应 应用:适应于氨基酸、多肽和蛋白质的定性和定量分析。 分光光度计:在波长570nm下,测定吸光度。 氨基酸在溶液中有如下平衡: RCHCOO-

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