微生物第七微生物的生长和遗传变异剖析.pptVIP

7.1.2 微生物生长的测定方法 第三节 菌种的驯化及保藏 定向培育：通过有计划、有目的地控制微生物的生长条件，使微生物的功能向人类需要的法相发展。在污水生物处理中，这个过程叫驯化。 污泥驯化是首要且关键的一环。 目的： （1）培养微生物的抗毒性 （2）培养出具有特异和高效降解特性的微生物，使微生物对于待处理污水中的碳（能）、氮源物质由不利用到利用，由缓慢利用到快速降解。 2、 菌种的复壮： 使衰退的菌种恢复原来优良性状。狭义的复壮是指在菌种已发生衰退的情况下，通过纯种分离和生产性能测定等方法，从衰退的群体中找出未衰退的个体，以达到恢复该菌原有典型性状的措施；广义的复壮是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常、进行纯种的分离和生产性能测定工作，以期菌种的生产性能逐步提高。 菌种的复壮措施：①纯种分离：（平板划线法、涂布法、倾注法、单细胞挑取法等）。 ②通过寄主体内生长进行复壮（如Bacillus thuringiensis的复壮） ； ③淘汰已衰退的个体（采用比较激烈的理化条件进行处理，以杀死生命力较差的已衰退个体）。④采用有效的菌种保藏方法。 3、防止菌种衰退的方法： ①控制传代次数（一般在DNA的复制过程中，碱基的错配率是5x10-4，自发突变的频率为10-8~10-9，采用良好的菌种保藏方法，可以减少移种和传代的数）；  ②选择合适的培养条件；  ③采用不同类型的细胞进行传代（对丝状微生物而言，通常采用稳定的单核孢子进行接种）；  ④采用有效的菌种保藏方法。 * 第一节 微生物的生长和特性 第二、三节 微生物的遗传与变异 第四节 遗传工程 第五节 微生物的驯化与保藏 第七章 微生物的生长和遗传变异 第一节 微生物的生长和特性 生长 微生物同化作用＞异化作用——个体增大 微生物的裂殖——个体数量增多 繁殖 生长 繁殖 基础 条件 联系紧密 本节主要内容： 一 微生物生长的测定方法 二 微生物的生长曲线 三 微生物的生长曲线与废水生物处理的关系 四 微生物膜的生长特性 ·显微镜直接计数 涂片染色计数 血球计数器计数 ·间接计数法 平板菌落计数法（活菌计数法） 液体计数法（统计学原理） · 测生长量法 细胞重量法：湿重与干重（MLSS） 光密度法 薄膜计数法 比例计数 元素法等等 重量法 测定细胞干重 离心法 过滤法 105℃~110℃干燥 水处理构筑物内微生物生长量常采用该法。 活性污泥法中采用的指标是 混合液悬浮固体（MLSS） （Mixed Liquid Suspended Solid） MLSS（mg/L 或 g/m3） MLSS＝Ma+Me+Mi+Mii Ma: 活的微生物细胞; Me: 微生物内源代谢残留物 Mi: 难于生物降解的有机物； Mii:附在活性污泥上的无机物 做法：取一定体积的待测污泥样品，放于蒸发皿中干燥，然后称重。 作为表示活性污泥微生物量的相对指标。 二 微生物的生长曲线 微生物的生长有没有规律性？ ？ 有规律 微生物的生长曲线：将少量纯菌接种到一定量的液体培养基内，在适宜的温度下培养，并定时取样测定活微生物的数目和重量的变化，以活微生物个数的对数或活微生物重量为纵坐标，以培养时间为横坐标作图，所得的曲线即为微生物的生长曲线。 这种培养方式为间歇培养或分批培养。 问题：微生物有几种生长曲线呢？ （一）以活微生物数目的对数绘制的生长曲线 适应期 对数期 稳定期 衰亡期 活菌数 培养时间（h） 微生物数目的对数 （1）适应（缓慢）期 （2）对数期 （3）稳定期 （4）衰亡期 1 适应期（缓慢期） lag phase 适应期 特点 初：细菌数目不增加，体积增长快。 后：个别菌体繁殖，个数少许增加。 曲线平缓。大量诱导酶的合成。 应用： 缩短此期，提高设备利用率 用处于对数期或代谢旺盛的活性污泥接种 2 对数期 log phase 对数期 分裂快，数目增多。 活菌数 ≈总菌数 直线上升 此时细胞的大小、组成、生理特征等均趋于一致，代谢活跃，生长速率高，代时稳定。 特点 应用： ＊接种用的好种子 ＊但处理效果不是最好，因为微①生物活性大就不易凝聚和沉淀；②要保证充足的食料，有机物浓度要保持较高水平。 3 稳定期stationary phase 稳定期 特点 应用：处于稳定期的污泥代谢活性和絮凝沉降性能均较好。 发酵产物形