《实验实训指导书》(药理学).docVIP

实验一 药理学实验基本知识和技术 实验目的：1、掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力； 更好地掌握药理学基本理论知识； 培养科学思维 （1）动物的标记 狗、兔等较大的动物可用特制的铝质号码牌固定在颈部或耳上。大鼠、小鼠动物捉拿固定方法 （1）小鼠和大鼠 ①颈静脉或颈动脉取血：麻醉动物，背部固定，颈部去毛，碘酒消毒，切开皮肤，分离出动脉或静脉，将注射针平行刺入血管，慢慢回抽针栓即可取血。动脉取血时，亦可将远心端结扎，用动脉夹夹住近心端，在动脉中央剪一小口，插入聚乙烯管，然后放开动脉夹，血液可自动流出。兔和豚鼠也常用此方法取血，手术操作与大鼠相似。 ②尾尖取血：将鼠固定在铁丝笼或特别筒内，使鼠尾露在外面。剪掉鼠尾（小鼠1mm～2mm；大鼠5mm～10mm），用拇指和食指由尾根向尾尖按捏，血液即从尾尖流出。小鼠每次可采血0.1ml，大鼠每次可采血0.5ml。注意：只剪去尾尖，如剪去过多组织，反而流血少。下次取血时，只需将尾尖血痂剪掉即可。 ③眼球取血：左手持鼠，使眼球突出，并使头向下。右手持弯曲镊，钳夹一侧眼球根部，将眼球摘除。血液即可从断裂的眼眶动物、静脉涌出，血量约为鼠体重的4％～5％，适用于一次性取血。 ④眼眶后静脉丛取血：固定鼠头部皮肤，轻轻向后压迫颈部两侧，使头部静脉回流受阻，眼球充分外突，用内径1～1.5mm的毛细血管 刺入下眼睑与眼球之间，轻轻向眼底部方向移动，血即可流入玻璃管内，一般两眼可各取一次。 ⑤断头取血：用剪子剪断鼠头，立即将鼠颈部向下，提起动物，并对准已准备好的容器，可接取所需血液。小鼠可取血约1ml，大鼠可取血约8ml。 （2）家兔 ①心脏取血：将家兔背位固定，在胸骨左缘3mm，第3～4肋间隙，触及心跳最明显部位，以8号针头刺入，即可有血流入注射器内，亦可抽取，如没刺入心脏，一定要将针提到 皮下改变方向，再重新刺入。 ②耳缘静脉取血：将耳根部压紧，拔去耳缘毛，用酒精涂擦使血管扩张明显，以6～7号针头，针尖向离心方向刺入，缓慢抽取血液。 ③股动脉、静脉取血：将家兔麻醉、背位固定，手术分离出股动脉或静脉，插入套管即可根据需要量取血。 4、动物的给药方法 （1）小鼠、大鼠 ①灌胃法(i.g.)：以左手固定鼠后，使其腹部朝上，颈部伸直。右手持配有灌胃针头的注射器，自口角插入口腔，再从舌面沿上腭进入食道。 ②腹腔注射(i.p.)：以左手固定鼠，方法同灌胃，右手持注射器，取30度角将针头从下腹部向头端刺入腹腔。进针部位不宜过高，刺入不宜太深，以免伤及内脏。 ③皮下注射(s.c.)：用左手固定鼠后，右手持注射器于拇指和食指捏起的皮肤处进针即可。 ④静脉注射(i.v.)：将鼠置于特制的固定筒内或倒置的大漏斗下，让其尾部露出。用酒精或二甲苯涂擦尾部，或将鼠尾在50℃热水中浸泡半分钟使血管扩张。左手拉尾端，右手持注射器将针头刺入尾静脉，推入药液。 （2）家兔 ①灌胃：需两人合作进行。一人取坐位用两腿夹持兔身，左手握家兔双耳，右手抓住两前肢。另一人将木制开口器横插家兔口内，压住舌头并固定之。取8号导尿管从开口器中部小孔插入食道。插管时如误入气管会出现动物的挣扎和呼吸困难。也可将导尿管的外端浸入水中，如有气泡吹出，表示插在气管内，此时应拔管重插。当判明导尿管在食道以内后，用注射器接通导尿管将药液推入。 ② 皮下、腹腔注射：给药方法基本上同小鼠，唯针头可稍大，给药量可稍多。皮下与肌内为0.5～1.0/mg，腹腔为1.0～5.0ml/mg。 ③静脉注射：将家兔置固定箱内，拨去耳壳外缘的毛，选择一条比较明显的耳缘静脉，用酒精棉球涂擦皮肤，使血管显露。用左手拇指和中指捏住兔的耳尖部，食指垫在兔耳注射处的下面，右手持注射器，将针头从近耳尖处刺入，当确认针头在血管中后，将药液推入。 5、动物的麻醉方法 （1）局部麻醉：常采用2％普鲁卡因做皮下浸润注射，可用于局部手术。 （2）全身麻醉： ①吸入麻醉：可将乙醚蘸在棉球上放入玻璃罩内，利用乙醚挥发的性质，经肺泡吸收，作用较快，适用于小鼠、大鼠短时间麻醉。 ②注射麻醉：常用戌巴比妥钠和乌拉坦。 注意事项： 配制注射用麻醉剂，一般用蒸馏水，也可用生理盐水。 静脉麻醉时，剂量要准确、浓度要适中，注射速度要缓慢，均匀。冬季作实验时，应将药液加温到动物体温水平。 密切观察动物眼睑，角膜及趾反射，避免麻醉过深引起动死亡。一旦麻醉过量，尽早采取人工呼吸等措施。 6、动物的处死方法 （1）小鼠和大鼠 常采用颈椎脱臼法，即用左手拇指和食指将其头部紧按在硬的物体上，右手捏住鼠尾，用力向后牵拉，使颈椎脱位，鼠可瞬间死亡。大鼠也常用断头法处死。 （2）家兔 空气栓塞法：用50～100ml注射器，往静脉内迅速注入空气，动物因血管气栓致死。家兔注射空气量为10～20ml。 三、实验设计基本原则 1、随机原则