苦瓜性别分化相分子标记的研究.pdf

苦瓜性别分化相关分子标记的研究 摘要 苦瓜(Momordica charant／a．L)是葫芦科苦瓜属的一年生蔓生植物，雌 雄同株。苦瓜在全国广泛栽培，是一种重要的蔬菜，而且具有药用价值。 目前，分子标记被广泛应用于植物的亲缘关系分析、种质鉴定、遗传 图谱构建、目标基因定位、辅助育种等各个方面，但在苦瓜方面的应用较 ified 少。本试验采用随机扩增多态性DNA(RandomAmpl RAPD)技术和简单重复问序列标记(int．er-simplesequencerepeat，ISSR) 技术，研究与苦瓜性别连锁的分子标记。研究结果如下： 1．用CTAB改良方法可以快速提取苦瓜基因组DNA，其浓度和纯度达到 了RA阳和ISSR分子标记试验的要求． 2．优化苦瓜RAPD体系，从200条随机引物中筛选出8条可能与性别连 ，锁的RAPD标记。利用全雌、强雌和强雄个体进行验证，发现引物S30所扩 都出现，而在所有强雌和强雄个体中都不出现，初步表明这两条是与雌性 紧密连锁的RAPD分子标记。 说明s30卿与苦瓜雌性基因连锁。 4．利用lSSR技术进行苦瓜性别的研究，建立苦瓜ISSR--PCR反应体系， 得到清晰的ISSR指纹图谱。 用全雌、强雌和强雄个体进行验证，发现引物807所扩增的约400bp的谱 全雌性个体都出现，而在所有强雌和强雄个体中都不出现，初步表明这可 能是三条与雌性紧密连锁的ISSR分子标记。 SCAR 关键词：苦瓜性别分化RAPD ISSR THEMOLECULARMARKERSTUDYON SEXDIFFERENTIATl0NOFMOMORDlCACHARANTIA．L ABSTRACT charanttaL)缸UmemberofCucurbiteaeandan Bittermelon(Momordica herbaceousannual of inalldirections．Itisamon∞ciow trufling capablespreading iscultivatedaroundthe andEastAsiaforitsimmaturefruitswith that country plant medicinalvalue． highly markershavebeen usedin Molecular widely genetic of markersassisted location，molecular polymorphism，constructiongeneticmap，gene inthe and varietiesidentification researches selection，and Vel；etabk therehasbeenIittleresearchaboutbittermelon．Thisstudiedthetoolecular paper sex melonwith markersrelatedtothe differentiationofbitter DNA)and