罗红霉素在中华体内残留检测及药动学研究.pdf

II II IIIlU IIl lIIII I[II Y2070413 罗红霉素在中华鳖体内残留检测及药动学研究 摘要 中华鳖是我国特有的名特水产养殖品种之一，营养丰富，经济价值高， 目前己在全国各地广泛养殖。罗红霉素作为第二代大环内酯类广谱抗生 素，主要应用于水产养殖中弧菌病、龟鳖白眼病等防治。本文以中华鳖为 实验材料，利用液相色谱．串联质谱技术，研究了罗红霉素的快速准确高 效检测方法及其在中华鳖体内的代谢规律，旨在为罗红霉素的安全规范用 药及质量安全评价提供技术支撑。 1、建立了中华鳖血液中罗红霉素的超高效液相色谱．串联质谱检测方 法。优化了检测条件，并比较分析了乙酸乙酯、乙醚、正己烷：异丙醇 酸乙酯：乙醚=50：50(v：v)等六种不同提取剂的提取效果，结果表明以乙酸 乙酯为提取液提取效率最高。对乙酸乙酯提取液在五种不同pH条件下的 提取效果进行了比较，以pH=8．5的条件下为最好。优化建立的测定方法 为：中华鳖血液样品采用乙酸乙酯提取，用碳酸钠溶液调节pH=8．5，正 己烷脱脂后，过0．21am滤膜至进样瓶供液质测定，外标法定量。电喷雾 ESI正离子扫描模式下进行多反应MRM监测，选用的离子对为 方法的线性范围为O．1．1000ng／mL，相关系数R=0．9996。在加标浓度 T 3．90％．9．75％，定量限为O．1ng／mL。 2、评定了方法的不确定度。建立了血液中罗红霉素残留测定方法的 不确定度数学模型，分析了不确定度的主要来源并进行不确定度分量评 定。结果表明：方法的不确定度来源包括取样时引入的不确定度，定容体 积引入的不确定度以及上机液浓度测定引入的不确定度。对5ng／mL的加 标样品进行了六次测定，测定的平均值为4．77ng／mL，合成不确定度为 3、研究了罗红霉素在中华鳖体内的残留代谢规律。连续7d投喂含有 60mg／kg罗红霉素的药饵，利用液相色谱．串联质谱法分析了肝脏、血液 和肌肉中罗红霉素的残留量，并利用3P37药动学软件进行数据分析。结 果表明：罗红霉素在中华鳖血液、肌肉和肝脏中达峰时间分别为2h、8h Xe。o·8514l+1．471 学方程分别为：C血浆=40．21 Xe‘o·179龇，C肌肉=3．349X 期分别为38．5h、15．6h和100．5h。在此剂量下的建议休药期375度日。 4、初步分析了罗红霉素在中华鳖血液内的代谢产物。利用液相色谱 串联质谱技术，比较分析了给药后2h和24h后中华鳖血液中的罗红霉素 代谢产物并对其进行了二级质谱分析。结果表明：罗红霉素在中华鳖血液 中的代谢产物有三种，分别是N．去甲基代谢物、红霉素肟和罗红霉素脱 克拉定糖代谢物，并探讨了罗红霉素的代谢途径。 关键词：中华鳖；罗红霉素；液相色谱．串联质谱；不确定度；药动学 浙江：I：商人学硕士论文’ STUDYOF DETERMINATIoNANDPHARMAC0l(INETIC IN TURTLEBY ROXITHROMYCINSOFT-SHELLLIQUID CHROMAToGRAPHY—MASSSPECTRoMETRY ABSTRACT l mass spectrometry Byusingiquidchromatography—tandem