苦瓜子叶不定芽导研究.pdf

摘 要 建立稳定、高效的苦瓜不定器官再生体系是苦瓜转基因成功的关键环节。本研究分 别以‘翠妃’、‘翠秀’的子叶作为外植体，比较系统地研究了子叶离体培养的技术体系， 初步探讨了子叶苗龄、子叶的部位、基本培养基、不同的植物生长调节剂、暗培养、硝 酸银浓度等对苦瓜子叶不定芽诱导的影响。其试验结果表明： (1)子叶苗龄：不同苗龄的子叶不定芽再生率的差异很大，本试验表明，‘翠妃’、‘翠 秀’均以9d左右的苗龄培养效果最好。 (2)子叶部位：子叶不同部位不定芽的再生率差异显著，本试验研究表明，‘翠妃’、‘翠 秀’都是在子叶基端外植体临近下胚轴的部位诱导效果最好。 (3)在本试验所用的32个植物生长调节剂组合处理中，‘翠妃’表现出较好的再生力， ‘翠秀’则次之。通过比较不定芽再生率及平均每叶芽数两个指标，两个品种的最适不 定芽诱导培养基和再生率分别是： ‘翠妃’：MS+BAl．0 mg／L+NAA0．2mg／L，不定芽诱导率为54．21％ ‘翠秀’：MS+BAl．0mg／L+NAA0．2 m班，不定芽诱导率为19．45％ (4)BA、KT两种细胞分裂素在苦瓜子叶不定芽再生上的诱导结果表明，BA的诱导效 果优于KT。 ‘翠妃’，NAA的诱导效果好于其它三种。对于‘翠秀’，NAA、IAA的诱导差异不明显。 在培养基中加2，4-D时，两个品种均无不定芽再生。 (6)暗培养对‘翠妃’、‘翠秀’子叶不定芽诱导有显著的促进效果。暗培养7d可将不 定芽再生率分别由51．98％、18．90％提高到77．44％、35．31％。但随着暗培养 时间延长，子叶不定芽再生率下降。 (7)AgN03对‘翠妃’、‘翠秀’的子叶不定芽再生有明显的抑制作用，且当浓度达到 6mgm以上时，两个品种的子叶块上均无不定芽再生，只长有少量的根。 (8)通过考察增殖倍数，两个品种的最佳增殖培养基和增殖倍数分别是： ‘翠妃’：MS+BA0．5mg／L+NAA0．1mg／L，增殖倍数为5．40 ‘翠秀’：MS+BA0．75mpJL+NAA0．1mg几，增殖倍数为5．06 (9)结合生根率及根的生长情况，两个品种的最佳生根条件分别是： ‘翠妃’：MS+NAAO．25mg／L，生根率为99．15％ ‘翠秀’：MS+NAAO．25mg／L，生根率为93．51％ charantiaL．1：子叶：离体培养；不定芽再生 关键词：苦瓜(Momordica The ofInVitroCultureand from System Regeneration ofBalsam charantia三．) Cotyledonspear(Momordica LiJing(pomology) DirectedPro￡LiHuanxiu by of and Horticulture，Sichuan fCollegeForestry Agricultural 625014) ABSTRACT Thestableefficient isthe tosuccessfor system prerequisite plantregeneration different transformation．Inthis of cotyledon study，the age