磷酸寡糖全酶法备工艺的研究.pdf

， 一 lIllll I IIIII I I I IIII 111 735206 Y1 摘要 磷酸寡糖(Phosphoryl 磷酸根通过共价键连接的一种新型功能性低聚糖，由麦芽三糖至麦芽六糖组分组成。 作为一种天然、安全的新型功能性低聚糖，磷酸寡糖除具备一般低聚糖的理化特性外， 心 还具有促进体内钙、铁等矿物质吸收和溶解、抗龋齿、抗淀粉老化、水果和切花保鲜 ● 等独特的功能特性，可广泛应用于食品、保健、医药、饲料添加剂等行业。尤其值得 注意的是磷酸寡糖的补钙补铁功能。钙铁都是人体内丰富的矿物质，对人体的作用不 ‘ 言而喻，而今缺钙缺铁现状严重，一般的补钙补铁产品效果欠佳。磷酸寡糖在弱碱性 ‘ 条件下，能与钙、铁等矿物质形成可溶性复合物，使得钙、铁离子在肠道内保持较高 的浓度，从而促进人体的吸收，是一种很好的新型补钙补铁制剂。因此，研发制备磷 酸寡糖，具有重要的现实意义。本文对全酶法制备磷酸寡糖的工艺进行了优化研究， 具体研究内容如下： 1．对目前国内外已有的磷酸寡糖的构成、功能特性研究及相关糖类的制备、分 离检测方法展开综述；分析比较了磷酸寡糖与相关产品的补钙补铁及抗龋齿、抗淀粉 老化功效；磷酸寡糖制备工艺中涉及到的结合磷含量的测定方法、液化工艺、低聚糖 的分离检测方法等。 2．以市场随机购买韵蓰粉及淀粉磷酸酯为原料，通过分光光度法及感应耦合等 离子体原子发射光谱(ICP．AES)法对其中的总磷含量及结合磷含量进行了测定分析。 分光光度法的测定波长为825nm，且较ICP．AES法更适于淀粉磷酸酯中磷含量的测 定。市售马铃薯淀粉的平均结合磷含量为440ppm，而市售淀粉磷酸酯的结合磷含量 均较低，不适于磷酸寡糖的制备研究。 3．采用全酶促反应机制结合低压喷射液化技术制各磷酸寡糖前体—低DE值麦 芽低聚糖浆。工艺流程中考虑pH、酶用量、糖化时间、糖化温度对DE值的影响作 用。通过响应面分析法(RSM)优化出制备DE值为35的低聚糖浆的最佳酶解条件 为：淀粉乳浓度150a6、pH值5．9、耐高温a．淀粉酶用量35U／g，真菌酶用量2．3 rain。通过高效阴离子 U／g、普鲁兰酶用量1．0U／g、糖化温度60℃、糖化时间148 交换色谱(HPAEC．PAD)定性分析，确定麦芽低聚糖浆的主要组分麦芽二糖、麦芽 三糖、麦芽四糖、麦芽五糖、麦芽六糖及麦芽七糖。 ，‘ ● e ● ● BCW-2501阴离子 4．通过柱层析方法对磷酸寡糖进行分离纯化。采用Chitopearl G．10柱层析脱 0．1mol／LNaCl乙酸．乙酸钠缓冲液(pH=4．5)洗脱磷酸寡糖。Sephedex 盐，以水为流动相，脱盐效果较好。以结合磷含量为指标，磷酸寡糖的柱层析分离纯 化得率为76．97％。 匀