牛源乳铁蛋白体抗乙肝病毒感染HepG2细胞的研究.pdf

摘要 目的：乳铁蛋白是一种具有多种生理功能的天然活性糖蛋白，研究表明乳铁蛋白能够抑 制多种病毒，如人体免疫缺陷性病毒(HIⅥ、细胞巨化病毒、疱疹病毒l和2型、丙型肝炎病 毒(HCVl等。本课题旨在研究牛源乳铁蛋白、锌饱和乳铁蛋白、铁饱和乳铁蛋白以及乳铁蛋 白水解物对乙型肝炎病毒的抑制作用． 方法：本研究采用天然唧v感染HeDG2细胞建立病毒细胞模型，通过M丌法测定BLF、 zn_BLF、Fe．BLF及乳铁蛋白水解物的对细胞的毒性并确定最大无毒作用剂量，并以此剂量 作倍比稀释进行抗病毒研究；试验采用ELISA法应用乙型肝炎表面抗原试剂盒检测乙型肝炎 表面抗原的被抑制情况，同时采用荧光定量PCR法对HBV-DNA的被抑制情况进行测定． 结果： ·mJ．J，并通过对其生长曲线的测定确定了应用含3％血清的培养液作为维持液来培养细胞。 BLF的最大无毒剂量为3．0 Fe-BLF的最大无毒剂量为3．0 g-L1；乳铁蛋白水解物的最大无毒剂量为1．5g-L1。试验均采 用其无细胞毒性剂量进行抗病毒研究。 乳铁蛋白水解物对HBsAg分泌无抑制作用。BLF不能通过与HBV结合来抑制皿v对细胞 的感染，但可以通过与细胞某位点结合来阻断HBV对细胞的侵染。 白水解物对HBV-DNA只有微弱的作用。 结论：本研究结果表明，在体外牛源乳铁蛋白及锌、铁饱和乳铁蛋白对乙型肝炎病毒有 显著的抑制作用，但乳铁蛋白水解后对乙型肝炎病毒无明显抑制作用，这说明其抑制作用与 乳铁蛋白的整体结构有关，但其作用机制应是多方面的，且有待于进一步探讨。 关键词牛源乳铁蛋白：锌饱和乳铁蛋白；铁饱和乳铁蛋白；乳铁蛋白水解物；乙型肝炎病毒 乙型肝炎表面抗原；抑制作用；HepG2细胞系 Studiesof EffectofBovineLactoferrinon Inhibitory BVirus Cellinvitro HepatitisbyInfectingHepG2 Abstract whichhas funetiomisanaturalactive Objective：Laetoferrinmulti-physiological giycoproteim StudiescmlfhmthatLactoferrincallinhibit viruses．suchashuman many virusIandlI Cvims(ncv)eta1．This virus(HIⅥ，eytomegalovirus，herpestypes，Hepatitis paper aimedal the effectofbovine studyinginhibitory lautoferrin, iron-saturated lactuferrinandlaetoferrin onHBV． hydrolysate Methods：NatureB usedtoinfect test virus(帅v)was cell∞model，MTT h印撕tis HepG2 wasusedtoexalnine effectof zinc-saturated laetoferrin c州oxic BLE l拟oferrin,iron-saturated andlaetofmrin inaximumnontoxic those wemde