牛肝菌液态发酵成茶氨酸的研究.pdf

摘要 茶氨酸是茶树中一种特殊的非蛋白质游离氨基酸，对绿茶的良好滋味起到积极作 用．近年来，大量研究表明茶氨酸具有重要的生理和药理作用，可作为食品滋味增强 剂和人体保健添加剂，在食品、医药行业具有广阔的应用前景，人们对茶氨酸的需求 量也将越来越大。因此，为了获得大量的茶氨酸，很多学者研究了不同的茶氨酸生产 方法，主要包括茶叶或其富集液提取法、化学合成法、茶愈伤组织培养法和微生物酶 促合成法。 一种牛肝菌(褐绒盖牛肝菌。Xerocomus badius)q’也有微量茶氨酸存在。但是否与茶氨 酸存在于山茶科类植物中类似，茶氮酸也存在于牛肝菌科中的其他牛肝菌中，目前未 见有相关研究报道。同时，能否利用相关牛肝菌液态发酵生成茶氨酸，．也未见报道。 本论文围绕上述问题，主要进行了以下研究：不同牛肝菌子实体中茶氨酸的分析检测： 牛肝菌液态发酵生成茶氨酸的实现及条件优化；牛肝菌液态发酵合成茶氨酸关键酶的 初步推断。 首先，论文运用毛细管电泳技术对褐绒盖牛肝菌(Xeroeomusbadius)、乳牛肝菌 bovinus)、黄牛肝菌(Boletusauripes)和黑牛肝菌(Boletusaereus)子实体干品中 (Suillus 的茶氨酸及其他游离氨基酸同时进行了分析定量。结果表明，褐绒盖牛肝菌、乳牛肝 菌、黄牛肝菌和黑牛肝菌中茶氨酸的含量(占干重)分剐为29．86mg／lOOg、 其次，论文首次实现了褐绒盖牛肝蔼和乳牛肝菌的液态发酵，用于生成茶氨酸。 并通过响应曲面法优化了液态发酵条件。结果表明，褐绒盖牛肝菌液态发酵的最佳关 5．63时， 茶氨酸产量可达17，22mg／L；乳牛肝菌液态发酵的最佳关键因子值分剐为葡萄糖 5．58时，茶氨酸产量可达 30．129／L，酵母膏6．779／L，装液量60．10mL，起始pH 15．15mg／L。 最后，论文对牛肝菌液态发酵合成茶氨酸关键酶进行了初步推断。结果表明，谷 氨酰胺合成酶催化反应体系中检测到了茶氨酸的生成，初步推断牛肝菌体内合成茶氨 酸的关键酶可能为谷氨酰胺合成酶。， 本论文利用牛肝菌液态发酵直接生物合成天然茶氨酸，不同于传统方法，这将为 开辟一条新的茶氨酸生物合成的绿色生产途径奠定理论基础。 关键词：茶氪酸，牛肝菌，液态发酵，响应曲面法，毛细管电泳 Abstract Thaanineisa freeaminoacidintea specificnon—protein／c plants(Camellia sinensis)．It and tothe contributes positively tasteof teainfusion．Inrecent highly good green years， studieshaveshownthattheanine rolesin and many important plays physiological to functions．Dueits tasteandfavorable pharmaceutical good physiologicaleffects，the demandfortheaninecouldincreasenot asa foodadditivebut as