毛细管色谱法3.pptVIP

毛细管电泳 capillary electrophoresis 1 概述（generalization） 1940年，蒂塞利乌斯（ Tiselius，瑞典)将蛋白质混合液放在两段缓冲溶液之间，两端施以电压进行自由溶液电泳，第一次将人血清提取的蛋白质混合液分离出白蛋白和α、β、γ球蛋白；发现样品的迁移速度和方向由其电荷和淌度决定； 第一次的自由溶液电泳；第一台电泳仪； 1948年，获诺贝尔化学奖。 一、经典电泳分析 traditional electrophoresis 二、高效毛细管电泳分析 high performance capillary electrophoresis 三、分离过程 四、高效毛细管电泳的特点 2高效毛细管电泳理论基础 一、高效毛细管电泳(HPCE)基本原理 basic principles of PHCE 二、电渗现象与电渗流 electroosmosis and electroosmotic flow 2.HPCE中的电渗现象与电渗流 3.HPCE中电渗流的大小与方向 HPCE中电渗流的方向 4. HPCE中电渗流的流形 5. HPCE中电渗流的作用 三、HPCE中影响电渗流的因素 factors influenced electroosmosis 3. 电解质溶液性质的影响 4. 温度的影响 5. 添加剂的影响 四、淌度 mobility 五、HPCE中的参数与关系式  parameters and relation in HPCE 3.分离度 六、影响分离效率的因素—区带展宽 factors influenced the efficiency—band broadening 3.焦耳热与温度梯度的影响 4.溶质与管壁间的相互作用 5.其他影响因素 3高效毛细管电泳仪high performance capillary electrophoresis apparatus 一.仪器 二、仪器流程与主要部件 process and main assembly 1.高压电源 毛细管结构 3.缓冲液池 三、毛细管电泳的进样方式 injection method of HPCE 2. 电动进样方式 4 分离类型 一、毛细管区带电泳capillary zone electrophoresis ，CZE 二、毛细管凝胶电泳 capillary gel electrophoresis ，CGE 三、 胶束电动毛细管色谱（MECC ，MEKC）micellar electrokinetic capillary chromatography，MEKC 四、毛细管等电聚焦 capillary isoelectric focusing，CIEF 五、毛细管等速电泳 capillary isotachophoresis ，CITP capillary isotachophoresis ，CITP 六、毛细管电渗色谱 capillary electroosmostic chromatography ，CEC 一、离子分析 analysis of ion 阴离子分析 二、药物分析 analysis of pharmaceutics 三、手性化合物分析 analysis of chiral compounds 四、氨基酸与蛋白质分析 analysis of amino acids 蛋白质分析 五、核酸分析及DNA排序 analysis of nucleic acids and sequence of DNA 六、新进展advances and special topics 电压：0～30kV； 分离柱不涂敷任何固定液； 紫外或激光诱导荧光检测器； （可检测到：10-19～10-21 mol/L） （1）0～30 kV 稳定、连续可调的直流电源； （2）具有恒压、恒流、恒功率输出； （3）电场强度程序控制系统； （4）电压稳定性：0.1%； （5）电源极性易转换； 2. 毛细管柱 （1）材料：石英：各项性能好；玻璃：光学、机械性能差； （2）规格：内径20～75μm，外径350～400μm；长度=1m 毛细管是CE分离的心脏。理想的毛细管必须是电绝缘、紫外/可见光透明且富有弹性的，目前可以使用的有玻璃、熔融石英或聚四氟乙烯塑料等。毛细管内径一般为10　～100μm，其截面结构图标意图如图17.23所示。 紫外吸收 化学惰性，机械稳定性好； 4. 检测器 要求：具