生物效应检定法.pptVIP

研究概况 早在20世纪50年代，我国医药学者就开始利用生物活性检测法进行中药质量控制方面的研究。 1951年我国生药学家楼之岑院士报告了利用小鼠口服植物性泻剂（大黄）排出湿便效应，建立了泻下药的生物活性检测方法； 1997年周重阳等利用抗菌效应测定大蒜油中大蒜辣素和大蒜新素等活性物的含量。 这些研究，为中药质量生物活性检测方法的建立奠定了基础，但基于当时技术水平条件的限制，方法并不成熟，操作比较繁琐，精密度和重现性不高，在实际研究中尤其是中药质量标准中没有得到推广应用。 定义：药物累积法又称毒理效应法，该法系在用药后不同间隔对多组动物重复用药, 从而求出体存率, 并据此进行药动学计算。 应用实例： 1. 黄衍民等以小鼠的急性死亡率为指标,测定了乌头注射液的表观药动学参数,结果表明药物的消除呈一级动力学过程并符合一室模型,为临床合理用药提供了科学依据。 2. 周昆等用多次给药的小鼠半数致死量法,测定了香加皮配方颗粒在体内的残存量和表观毒代动力学参数。结果发现香加皮配方颗粒体内残存量并不是随着时间而一直降低,在6,12h出现了两个高峰点,其后呈一级动力学 消除,12h以后消除相的消除半衰期t1/2= 7.55h,消除速度常数K=0.0918/h。可知香加皮配方颗粒的毒性成分代谢过程较复杂,可能存在肠肝循环或毒性代谢产物生成。 板蓝根、冬虫夏草 人参 问题一 生物活性测定与中药的“功能主治”只能部分相关而不能完全一致。而且，现有的生物活性测定方法只能对中药的某种或某些主要功效进行验证研究,或在现有相对成熟的药效学实验中选取一种或几种方法和指标进行,难以完全真实地反映药物所有的功效。 问题二 生物活性测定方法学建立中标准品的选择 由于中药及中药注射剂成分复杂,而在生物检定法中规定,尽量采用基本同质的标准品以测定供试品的相对效价,首选中药标准品,并且大部分中药标准品都没有标定其效价,这就更增加了标准品选择的难度。 解决 尝试对中药标准品效价单位进行定义 利用生物活性测定法测定药物的效价时,要求已知标准品的理论效价,才能测定出供试品的测得效价。而由于中药标准品均没有标识其理论效价值,这就成了生物活性测定法用于中药质量控制的障碍,因此可利用西药理论效价标识的方法,尝试建立针对相应活性的中药标准品的效价单位,将大大推动中药标准品的发展。 问题三 生物测定方法存在一定因生物个体差异而引起的误差,精密度和重现性较差,因而对实验方法、观察指标、限值剂量的设计要求较高,需要多次验证,才能建立一种相对成型的方法和指标。 解决 对实验相关性和重复性进行严格要求 相关性，选取与药物的临床疗效有高度相关性的指标；重复性，由于生物活性法所用生物可能会因个体差异造成重复性差应在实验过程中在严格规定的条件下，保证实验的稳定性和可重复性；灵敏性，要求所选指标与药物浓度有良好的量效关系，并且能随药物剂量的变化有显著变化。 特异反应剔除和缺项补足 缺项补足 因反应值被剔除或因故反应值缺失造成缺项，致m不等时,根据实验设计类型做缺项补足，使各剂量组的反应个数m相等。 方法1：随机设计 对缺失数据的剂量组，以该组的反应均值补入，缺1个反应补1个均值,缺2个反应补2个均值。 方法2： 随机区组设计 结语 中药质量控制和评价是保证中药有效性和安全性的重要前提，是制约中药现代化发展的关键科学问题之一，也一直是中医药研究的难点和热点。现行的中药质量控制模式和方法仅能控制部分指标性成分的一致性和稳定性，不能直接反映有效性和安全性，难以完全、有效控制中药的质量。 现有主要生物效应有:酶活力、抗病毒、抗炎、抗菌活性等。但由于很多中药的作用不是单一的,而是复合的。而我们要做的就是寻找把这些复合作用进行生物效应评价的方法，建立药物生物效应评价法的标准体系。 我们可以尝试将生物离体模型与生物整体相结合进行试验，用数学的方法相关联，寻找适合的评价标准体系。 解决 能否用西药或中药中的指标成分作为其标准品还有待进一步的研究？ 特异反应剔除和缺项补足 特异反应剔除 在同一剂量组内的各个反应中，如出现个别特大或特小的反应，应按下法判断其是否可以剔除。 方法如下，将各数值按大小排列如下： 中药分析 第四组 第四组 生物效应测定法在中药中的应用 发展概况 方法介绍 应用及价值 问题及解决 生物效应测定法 一、发展概况 生物效应测定法：以药理学为基础，生物统计为方法，运用特定的实验设计，是利用药物对于生物整体、离体器官、细胞、酶或分子等所起的作用, 在严格控制的试验条件下,通过比较对照品和供试品对生物体或离体器官与组织的特定生物