酸牛乳中山梨酸苯甲酸的测定.pptVIP

酸牛乳中山梨酸、苯甲酸的测定（气相色谱法） 物质介绍 山梨酸和山梨酸钾是限量添加的食品添加剂，苯甲酸和苯甲酸钠是目前国家已不允许添加的食品防腐剂。苯甲酸和苯甲酸钠对细菌、霉菌等有较强的抑制作用，特别是在酸性食品中效果更好，当ph4时效果明显下降；山梨酸和山梨酸钾适用于ph5的食品防腐，对于霉菌、酵母菌、需氧菌的抑制均有效，但对厌氧菌与噬酸乳杆菌几乎无效。山梨酸是不饱和脂肪酸，进入人体后，直接参与脂肪代谢，被氧化成二氧化碳和水，比苯甲酸更为安全。 原理 样品酸化后，用乙醚提取山梨酸、苯甲酸，用带氢火焰离子化检测器的气相测谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量。 仪器和试剂 （1）仪器 气相色谱仪； 具有氢火焰离子化检测器（FID）； 微量进样器（2ul）。 （2）试剂 1、乙醚（ch3ch2och2ch3);不含过氧化物。 2、石油醚；沸程30~60度。 3、无水na2so4。 4、hcl(1+1):取100ml盐酸，加100ml水，混合均匀。 5、nacl酸性溶液（40g/l);于nacl溶液（40g/l）中加0.5mlhcl（1+1）酸化。 6、山梨酸酸、苯甲酸混合标准贮备液（2.000mg/ml）：准确秤取山梨酸、苯甲酸各0.2000g，置于100ml容量瓶中，用石油醚+乙醚（3+1）混合溶剂溶解后并稀释至刻度。 7、山梨酸、苯甲酸混合标准使用液：分别吸取0.25ml、0.50ml、0.75ml、1.00ml、1.25ml山梨酸、苯甲酸混合标准贮备液，用石油醚+乙醚（3+1）混合溶剂稀释定容至10ml，此溶液每毫升含有50ug，100ug，200ug，250ug山梨酸或苯甲酸。 测定方法 （1）样品提取 秤取2.500g已混合均匀的待测样品，置于25ml具塞量筒中，加0.5mlhcl（1+1）酸化，分别用15ml、10ml乙醚提取，每次振摇1min，将上层乙醚提取液吸入另一个25ml具塞量筒中，合并乙醚提取液。用3mlnacl（40g/l）酸性溶液洗涤两次，静置15min，用滴管将乙醚层通过无水na2so4滤过25ml容量瓶中，加乙醚至刻度，均匀。准确吸取5.00ml乙醚提取液于5ml具塞刻度试管中，置40度水浴上挥发干，加入2.00ml石油醚+乙醚（3+1）混合溶剂溶解残渣，备用。 （2）色谱参考条件 色谱柱 内径3mm、长2m玻璃珠，内装涂以5%（质量分数）DEGS+1%（质量分数）H3PO4固定液的60~80目Chromosorb WAW。 气体流度 载气为N2和空气、H2流速比按色谱仪型号不同选择各自的最佳比例条件。 温度 柱温170度，进样器230度，检测器230度。 计算 山梨酸（或苯甲酸的含量，g/kg） =(A*1000*1000)/（m*0.2*V2\V1*1000*1000) 由测得苯甲酸的量乘以1.18，即为样品中苯甲酸钠的含量。 结果的表达：报告算术平均值的2位有效数字。允许差：相对误差《10%。 讨论 该方法山梨酸回收率81%~98%，相对标准偏差2.4%~8.5%；苯甲酸回收率为92%~102%，相对标准偏差0.7%~9.9%。 该方法也适用于酱油中山梨酸、苯甲酸含量的测定。 （3）测定 吸取标准系列中各浓度标准使用液2.00ul进样，可测得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰高，以浓度为横坐标，相应的峰高值为纵坐标，绘制标准曲线 同时吸取样品溶液2.00ul进样，测得峰高与标准曲线比较定量。 谢谢欣赏 嘎嘎 * * *