《MS培养基》.docVIP

MS培养基MS是Murashige and Skoog的缩写，MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要,因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。 　　MS培养基是目前使用最普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存和消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不会影响离子间的平衡。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养，其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此，一般情况下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高，这是它的显著特点。 MS培养基配方单 　　单位mg/L 　　大量元素：NH4NO3 1 650 　　KNO3　1 900 　　CaCl２·2H2O 440 　　MgSO4·7H2O 370 KH2PO4 170 　　微量元素：KI 0.83 　　H3BO3 6.2 　　MnSO4·4H2O 22.3 　　ZnSO4·7H2O 8.6 　　Na2MnO4·2H2O 0.25 　　CuSO4·5H2O 0.025 　　CoCl2·6H2O 0.025 FeSO4·7H2O（27.8）+Na2-EDTA·2H2O（37.3） 　　有机成分：肌醇 100 　　烟酸 0.5 　　盐酸吡哆醇（维生素B6） 0.5 　　盐酸硫胺素（维生素B1） 0.1　甘氨酸 2 　　注意：肌醇一般是要另外分开来独自配成浓缩液，因为它比较难溶，一般配成100倍，而除去肌醇后的有机，还是可以配成1000倍的。 编辑本段 MS培养基配方表大量元素 成分 分子量 使用浓度 (mg/L) 硝酸钾 KNO3 101.11 1900 硝酸铵 NH4NO3 80.04 1650 磷酸二氢钾 KH2PO4 136.09 170 硫酸镁 MgSO4.7H2O 246.47 370 氯化钙 CaCl2.2H2O 147.02 440 微量元素 碘化钾 KI 166.01 0.83 硼酸 H3BO3 61.83 6.2 硫酸锰 MnSO4.4H2O 223.01 22.3 硫酸锌 ZnSO4.7 H2O 287.54 8.6 钼酸钠 Na2MoO4.2 H2O 241.95 0.25 硫酸铜 CuSO4.5 H2O 249.68 0.025 氯化钴 CoCl2.62 237.93 0.025 铁盐 乙二胺四乙酸二钠 Na2.EDTA 372.25 37.3 硫酸亚铁 FeSO24.7H2O 278.03 27.8 有机成分 肌醇 100 甘氨酸 2 盐酸硫胺素 VB1 0.1 盐酸吡哆醇 VB6 0.5 烟酸 VB5 或 VPP 0.5 蔗糖 sucrose 342.31 30g /L 琼脂 agar 7 g /L 注意事项： 　　1.母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。 　　2.母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。 　　3.MS培养基中还需要加入2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)、萘乙酸(NAA)、6 苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液(0 1 mg/mL)。其配制方法是：分别称取这3种物质各10 mg，将2，4-D和NAA用少量(1 mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1 mL)的物质的量浓度为0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100 mL，即得质量浓度为0 1 mg/mL的母液。 4.组织培养是否能够获得成功，主要取决于对培养基的选择。不同的培养基具有不同的特点，也就适合于不同的植物种类和接种材料。在开展组织培养项目时，首先要对各种培养基进行了解和分析，以便能从中选择合适的使用。组培用的培养基一般包括基础培养基和激素，但是植物激素的种类和数量，随着不同培养阶段和不同材料有变化，因此各培养基配方中均不列入植物激素。常用的基础