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寄生虫学标本制作 标本制作的操作步骤 1.标本的采集、收集 2.固定 3.染色 4.退色 5.脱水 6 .分化 7 .封片 第一节 标本的收集与采集 从肺部、皮下肌肉、脑、眼等采集成虫。 3.肺吸虫成虫： 4.血吸虫成虫： 固定 10%甲醛加压固定，加压时应注意 选择虫体大小一致，整齐排列在一块玻 板上，然后在虫体周围加上足够的10%甲 醛，最后用另一玻板复盖上，在玻板上 加上一定重量东西，使虫体变薄同时得 到固定。 压力要逐渐加大，使虫体压得 尽量薄，但又不能使虫体压碎。 (二)、线虫成虫标本的采集： 1.驱虫法：可获得蛔、钩、鞭、蛲成虫。 2.自动排出： 3.旋毛虫幼虫标本的收集： 采用手术 或动物感染方法， 4.丝虫成标本的收集： 5.微丝蚴标标本的收集： (三)绦虫成虫标本的收集： 1.自动排出 2.驱虫获得成虫标本 3. 棘球蚴的收集： 眼、脑、口腔、皮下裂头蚴病。 4.裂头蚴的收集： 四 原虫标本的收集 1.血片采集 2.粪便采集原虫 1)溶组织内阿米巴 急性病人用 慢性及带虫者 2)蓝氏贾鞭毛虫 急性病人用 慢性及带虫者 3)隐孢子虫 取阴道分泌物涂片--查滋养体 3.其它组织 阴道毛滴虫 卡氏肺孢子虫 杜氏利氏曼原虫 取骨髓、淋巴结穿刺物作涂片 常用染色方法是吉氏和瑞氏染色 二、虫卵的收集、固定、保存及制片 (–) 虫卵的收集 1.从粪便中收集 可采用各种沉淀法。 2、从组织中收集 (1)从肺组织中收集肺吸虫卵：洗涤，用筛过滤于烧杯中，自然沉淀30分钟留渣固定作标本 (2)胆囊、肝胆管内收集虫卵： 主要收集华支睾吸虫和肝片吸虫的虫卵，把胆囊、肝胆道剪开， (3)肝组织中分离纯净虫卵法： 日本血吸虫虫卵大部分都沉积在肝组织中，从中可以收集到大量虫卵，分离方法如下： 虫卵标本的制作方法 操作步骤 一、脱水 1.经70%AIC洗涤后的标本，30%.40%.50%.60%.70%.80%.90%.95%(Ⅰ).95%(Ⅱ).纯酒精(Ⅰ).纯AIC（Ⅱ） 以后每隔15～20分钟换AIC一次。最后倒去上液，取沉渣 。 2.加少量甘油放入37度培养基内便含有水份全部干，再加甘油，约一个月后进行封片。 3、封片 临时封片法： 可以用凡士林或石蜡，将虫卵液密封于载玻片和盖玻片之间。石蜡需加热融化。 永久标本制作法 加拿大树胶双盖片法： 1.在载玻片上滴一小滴虫卵液。 2.取18mm×18mm的盖玻片， 放在虫卵液上。 3.在盖玻片其中央滴1一2滴 加拿大树胶。 4.取24mm×24mm的盖玻片封于其上。 虫卵液中可加一些盖玻片碎，以防虫卵被压破。 三、粪便标本的留取与保存 ?1.粪便标本留取必须做到 (1)容器应洁净无污染。 如果污染有尿液，能杀死粪便内原虫。 (2)送检单应标明送检医师的姓名， 受检病人的姓名，门诊号或住院 号，病床号等。 (3) 记录留取标本的时间， (4)容器上应有与送检单相同的编号。 有可能使肠道内的原虫检查出现假阴性。留取标本最好在服用这些药品之前或数周后。标本应及时送检，特别对肠道原虫的检查， 应尽可能在患者排便后半小时内检查。粪便标本如不能立即检查，或发现了可疑的原虫或蠕虫卵，一时鉴定不了，可以将标本及时固定，备查。 粪便标本的保存 将新鲜粪便作成铁苏木素染色或改良的抗酸染色玻片标本，可以较长时间保存。一般也可将粪便标本用保存液保存。 (一)10%福尔马林液 原虫包囊，蠕虫卵，蠕虫幼虫在此保存液内可较长期保存。保存蠕虫卵特别是线虫卵时，应将10%福尔马林液加热至60℃，维持约30分钟， 将其中的虫卵先杀死，以防止其继续发育。保存液与粪便标本应按3:1的比例加入，充分混匀，以保证良好的保存效果。如果粪便中粗渣过多，也可先过滤后再保存。 四、肉眼观察粪便性形状 1.成形粪 2.软便 3.烂便 4 .稀便 5 .粘液脓血便 粪便性状是患者消