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胰弹性蛋白酶的制备与分析 修改
生物制药工艺学实验 生物技术实验 实验要求 实验 2人一组， 穿工作服。 实验 听从老师安排，注意仪器使用，安全。 不得缺席，旷课三次没有成绩。 实验结束 洗涤，值日、检查安全。 实验报告： 英文书写 内容: 实验目的（英文） 实验原理（英文） 操作流程（英文） 实验结果（英文） 讨论（英文、中文或双语） 实验成绩评分标准 平时实验20 +实验报告60 +设计实验20 Experiment 1： Preparation of Elastic Protease from pancreas and Analysis of Enzyme Activity Purpose 2：Sample preparation Take 3 tubes to operate according to the table below: 制备工艺： 附： 树脂处理：取干Amoerlite CG50树脂，水漂洗后加5倍体积1N NaOH搅2小时，水洗至中性。加5倍体积1N HCl 处理2小时，水洗至中性，再用pH4.5 0.1M醋酸缓冲液平衡过夜。 注意事项 离心的转子和离心机配套使用。 离心前要平衡转子。 离心有机溶剂，要封上保鲜膜。 干燥蛋白前要封上保鲜膜并戳洞。 磁力搅拌器不要加热。 * 实验一： 胰弹性蛋白酶的制备与活性分析 1. Learn the principle of Preparation of Elastic Protease from pancreas. 2. Master the analysis method of enzyme activity. Frozen pancreas（75g） Activation 24℃，24h remove the fat，cut into pieces add 50ml HAc-buff ,mashed Pancreatic plasma add 250ml HAc-buff，ph4.5 25℃stir for 1 hours, Filter Filtrate 40g Resin Adsorption 25℃stir for 1 hours, Water washing Resin(absorb protein) add 50 ml 1M NH4Cl-buff，ph9.0 stir for 1h, adjust pH(5.2 pH 6.0) ，Filter Eluate Add 3-time-volumn cold acetone Room temperature 20min, 4000rpm×10min precipitation Acetone wash 2 times Ether wash one time，Vacuum drying Elastase powder Procedures 1 preparation of reference substance 30mg Congo red elastin 30ml standard elastic enzyme 37℃ 1h 50ml PB (pH 6.0) 50ml BB (pH 8.8) to the scale 2 Sample Reference 5mg 10ml pH8.8 BB buffer 3. standard curve *
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