表达中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白的重组痘苗病毒的构建及免疫效果初步评价.pdfVIP

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2015-09-04 发布于浙江
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表达中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白的重组痘苗病毒的构建及免疫效果初步评价.pdf

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生物技术通讯 194 LETTERSINBIOTECHNOLOGY Vol.26No.2 Mar.,2015 doi: 10.3969/j.issn.1009-0002.2015.02.009 研究报告表达中东呼吸综合征冠状病毒S蛋白的重组痘苗病毒的构建及免疫效果初步评价王平兴，任皎，赵莉，邓瑶，阳静，李善琴，阮力，谭文杰，田厚文中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，北京 102206 ［摘要］目的：以痘苗病毒天坛株为载体，构建表达中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）S蛋白的重组病毒疫苗，并进行免疫效果评价。方法：通过PCR扩增获得去除跨膜区的S蛋白基因片段S ，并构建重组痘苗病毒载体质粒 Q pJSC11LacZ7.5S ，将重组质粒与痘苗病毒同源重组并单斑纯化获得重组病毒毒株RVVMERS-S ，重组病毒免疫小鼠 Q Q 后用酶联免疫吸附实验（ELISA）和假病毒微量中和实验检测其诱发的S蛋白体液免疫反应水平。结果：构建了表达 MERS-CoV去跨膜区S蛋白的重组病毒RVVMERS-S ，其免疫小鼠后诱发了强的S蛋白体液免疫反应，血清IgG抗体 Q 滴度为1∶3200，中和抗体滴度达到1∶1000。结论：重组痘苗病毒RVVMERS-S 可在BALB/c小鼠体内诱发强的免疫 Q 反应，为MERS-CoV疫苗的研发提供了实验基础。［关键词］中东呼吸综合征冠状病毒；病毒载体；疫苗；棘突蛋白［中图分类号］ R392.1; Q78 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1009-0002（2015）02-0194-05 Construction of a Recombinant Vaccinia Virus Expressing Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus S Protein and Evaluation of its Immunogenicity in Mice WANG Ping-Xing, REN Jiao, ZHAO Li, DENG Yao, YANG Jing, LI Shan-Qin, RUAN Li, TAN Wen-Jie, TIAN Hou-Wen* National Institute for Viral Disease Control and Prevention, China CDC, Beijing 102206, China *Coresponding auther, E-mail: houwent@126.com ［Abstract］ Objective: To construct a recombinant vaccinia virus expressing middle east respiratory syndrome coronavirus（MERS-CoV）S protein and evaluate its immunogenicity. Methods: S fragment was amplified by PCR