艾迪注射液对肺癌SPCA1细胞的增殖抑制作用及其机制.pdfVIP

2015年3月 中成药 March2015 第37卷第3期 ChineseTmditionalPatentMedicine V01．37No．3 艾迪注射液对肺癌SPC—A-1细胞的增殖抑制作用及其机制 陈 军， 武延庆， 姚莉+ (兰州大学第二医院药学部，甘肃兰州730030) 摘要：目的研究艾迪注射液对肺癌SPC．A．1细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法采用巯基罗丹明B(SRB) 法检测艾迪注射液对肺癌SPC．A．1细胞的抑制率，流式细胞术检测细胞周期和凋亡，Hoechst33258荧光染色法观察细 胞核形态的变化，免疫印迹法(Western 液作用24h和48 射液作用48 P0．05)。结论艾迪注射液能够通过阻滞细胞G：／M期和诱导凋亡作用抑制肺癌SPC—A一1细胞增殖，其机制与降低 ERKl／2磷酸化水平和增加caspases．9及caspase一3活性有关。 关键词：艾迪注射液；SPC—A一1；周期；凋亡；ERKl／2；caspase 中图分类号：R285．5 文献标志码：B 文章编号：1001—1528(2015)03-0630-04 doi：10．3969／i．issn．1001—1528．2015．03．037 艾迪注射液是由斑蝥、人参、黄芪及刺五加提取制成 注射液处理组和对照组，根据文献[8]选用艾迪注射液 的抗肿瘤中药注射液，目前已广泛用于原发性肝癌，肺癌， 质量浓度依次为10、20、40、80、100 mg／mL，每组设3个 消化道肿瘤及妇科恶性肿瘤等的治疗。1引。体外研究显示， 复孔。取对数生长期SPC．A．1细胞，用0．25％的胰蛋白酶 它对多种肿瘤细胞具有增殖抑制作用M。7J，但尚未见艾迪注 消化，用含10％胎牛血清的RPMI一1640培养基稀释为单细 X 射液对肺癌SPC—A一1细胞作用的报道，本实验旨在观察艾胞悬液，并以8 103个／孔接种于96孔细胞培养板中。 24 迪注射液对肺癌SPC—A．1细胞增殖的影响，并对其机制进 h后艾迪注射液处理组分别加入经培养基稀释成不同质 行初步探讨。 量浓度的艾迪注射液；对照组则加入等体积的培养基。5％ 1材料与方法 h或48h后每孔加入预冷的50％TCA溶 CO：，37℃孵育24 液50止，4oC固定1h，去离子水洗涤5次，晾干；每个 1．1细胞系人肺癌SPC—A—l细胞购自中科院细胞库(上 海)，采用含有10％优级胎牛血清的RPMI一1640培养基培 10 oC。 min，1％冰醋酸溶液洗涤5次，晾干，加入150斗L 养，培养条件为5％C02、37 1．2药品及试剂艾迪注射液(批贵州益佰mmol／L的非缓冲Tfis碱溶液，振摇溶解并混匀。酶标仪 515 制药股份有限公司)；RPMI一1640培养基(北京赛默飞世尔nm波长处测定吸光度(OD)值并计算各组的增殖抑 生物化学制品有限公司)；巯基罗丹明B蛋白染料(SRB，制率。所有试验均重复4次。 美国Sigma公司)；细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒及细胞 凋亡荧光Hoechst33258检测试剂盒购自碧云天生物技术有为对照组，艾迪高质量浓度组(100mg／mL)，中质量浓度 mAb 组(50 限责任公司；Phospho—p44／42MA