基于β-葡萄糖苷酶活力蜂蜜真伪鉴别与研究.pdfVIP

第五届中国畜牧科技论坛论文集 561‘ 基于B一葡萄糖苷酶活力的蜂蜜真伪鉴别研究★ 张金连张翠平 郑火青 易松强 胡福良” 浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310058 摘要本文提出了以B一葡萄糖苷酶活力为指标的蜂蜜真伪鉴别新方法。采用分光光度法分 析不同来源蜂蜜中的B一葡萄糖苷酶的活力，研究了不同储存条件下蜂蜜中13一葡萄糖苷酶活 力的变化规律，探讨了掺入不同比例大米糖浆的蜂蜜中13一葡萄糖苷酶活力的变化规律。结果 表明：不同来源蜂蜜中均能检测出B一葡萄糖苷酶活力，而大米糖浆中检测不到该酶活力；不同 浓度油菜蜜分别在一18 3、4℃、室温、30℃下储存11个月，随着储存时间的延长，蜂蜜中13一葡萄 糖苷酶活力变化较小；随着油菜蜜中大米糖浆的掺假比例增大，B一葡萄酶活力成线性下降。因 此，B一葡萄糖苷酶活力是检测蜂蜜是否掺假的一个有效定性指标。 关键词蜂蜜；B一葡萄糖苷酶；真伪；鉴别 蜂蜜是一种天然产品，具有较高的营养和保健 本文采用分光光度法检测了不同来源和种类 功效，一直深受消费者的青睐。蜂蜜掺杂使假现象 蜂蜜以及市售大米高果糖浆中的B一葡萄糖苷酶 由来已久，严重影响了蜂蜜产业的健康发展、出口 活力；比较了不同储存时间和温度下蜂蜜中8一葡 创汇以及消费者的权益。近年来，蜂蜜掺假发展为 萄糖苷酶活力的稳定性；比较了掺入不同比例大米 掺人葡萄糖、葡萄糖浆、果葡糖浆等【11物质，这些 高果糖浆的蜂蜜中B一葡萄糖苷酶活力的变化规 掺假的蜂蜜感官指标和部分理化指标与天然蜂蜜 律，为蜂蜜的真伪鉴别提供理论依据。 极为相似。用稳定性碳同位素方法虽可以解决玉 1材料与方法 米高果糖浆等来源于C4植物糖浆的掺假问题，但 是，由于水稻与蜜源植物均为C，植物，而来源于水 1．1材料与仪器 稻的大米糖浆中同位素成分与天然蜂蜜极为相似， 5种天然蜂蜜从蜂场直接获得；12种国内蜂 目前用此方法较难鉴别出天然蜂蜜中是否掺人大 蜜、4种国外蜂蜜及大米糖浆购于市场。 米糖浆。因此，亟需建立一套行之有效的方法来鉴 对一硝基苯基一B—D一葡萄糖苷 pNPG ，北 别蜂蜜和大米高果糖浆。 京凯森医药科技有限公司；其他均为分析纯试剂。 蜂蜜是动植物双源性产品，蜜蜂在酿制蜂蜜时 UV2550紫外可见分光光度计，日本岛津公司。 加入了多种酶类，我们是否可以通过检测这些酶类 1．2方法 来判定蜂蜜的真伪呢?Low等首次在蜂蜜中检测1．2．1 B一葡萄糖苷酶活力的测定 到13一葡萄糖苷酶活力【2】。Pontoh等从意大利蜜采用pNPG法进行B一葡萄糖苷酶活力测定。 蜂的咽下腺、胃和蜜囊中分离纯化出B一葡萄糖苷 称取1．00 g蜂蜜样本，用柠檬酸一磷酸氢二钠缓 酶，而且这三个组织中的B一葡萄糖苷酶是相同 冲液 pH5．0 定容至10mL容量瓶，作为粗酶液。 mL30 的。因此，他们推断B一葡萄糖苷酶是由工蜂的咽 吸取1．0mL粗酶液和1．0 mM对硝基苯基 下腺产生，分泌到嘴里，通过饲喂到达蜜囊，然后从 B—D一葡萄糖苷 pNPG 于试管中，混匀后置于 蜜囊转移到巢脾【31。易松强等通过实验进一步证 37℃水浴中加热1．5h。在水浴申加热后的反应混 mLIM 实了蜂蜜中的B一葡萄糖苷酶来源于蜜蜂【4】。 合液中立即加入5．0 Na2CO，终止反应，冷 ·基金项目：国家蜂产业技术体系专项 CARS-45 资金资助项目 ·。通讯作者：胡福良，Tel：0571—座机电话号码；E-mail：flhu@zju．edu．cn。 562 蚕蜂科学 却至室温后在400姗处测定吸光值。另外，取1．O花蜜的5倍多。 mL mL粗酶液和1．030mM 不同植物来源、不同地理来源的国外市售天然 pNPG于试管中，立即 mLIM 置于沸水浴中加热5min灭活后加入5．0 蜂蜜均检测到B一葡萄糖苷酶活力，酶活力范围为 12．52—19．16 Na2CO，溶液，作为空白对照。 mU／G。 酶活力单位是每分钟催化形成一个微摩尔对 因此，不同来源的天然蜂蜜中均可检测到B一 硝基苯酚所需要的酶量为一个酶活力单位。蜂蜜 葡萄糖苷酶活力，但该酶活力依植物来源不同变化 中B一葡萄糖苷酶活力为每克蜂蜜具有的酶活力 很大。 单位数。 2．2不同储存条件对蜂蜜中B一葡萄糖苷酶活力 1．2．2样品处理 的影响 将新鲜的不同浓度 37波美度、39波美度、41 随储存温度、时间不同，37波美度油菜蜜中 波美度 的油菜蜜分装在若干个洁净的瓶子中，密 B一葡萄糖苷酶活力变化趋势不同。由图l可知， 封后分别置于一18℃、4℃、室温和30℃的冷柜或在低温 一18℃ 下，随着时间的延长，油菜蜂蜜 培养箱中储存，然后每月按照上述方法测定样品的 中B一葡萄糖苷酶活力无