槲皮素改善炎症微环境逆转多囊卵巢综合征胰岛素抵抗机制与研究.pdfVIP

大会发言 形成。结论t补肾中药可能通过调节卵巢血管舒．缩因子的表达，从而改善卵巢 局部血液供应，改善病理状态下模型大鼠卵巢的形态结构，并对E2、T产生影响， 促进了卵泡发育、成熟、排卵。 槲皮素改善炎症微环境逆转多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗的机制研究 1，第二军医大学长海医院中医妇科 2，上海市浦东新区中医医院妇科 摘要 目的观察槲皮素对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的治疗作用，并探讨其对多 囊卵巢综合征胰岛素抵抗微环境的重塑作用及相关机制。方法选择21日龄Wistar 雌性大鼠132只，按随机数目表法随机分为病理模型组 120只 和正常对照组 12 只 ，病理模型组用脱氢表雄酮诱导多囊卵巢综合征胰岛素抵抗大鼠动物模型。 造模成功的36只随机分为模型对照组、槲皮素组、二甲双胍组。正常对照组及模 型对照组给予2ml 1％羧甲基纤维素钠溶液灌胃处理，槲皮素组用槲皮素灌胃干 预，二甲双胍组用二甲双胍灌胃干预，持续灌胃28天。灌胃结束后观察大鼠的性 周期情况、大鼠体重、卵巢系数、大鼠卵巢形态学变化；并用氧化酶．过氧化物 酶方法测定空腹血糖；用酶联免疫方法检测血睾酮、胰岛素水平：用免疫组织化 学方法检测卵巢组织白介素．6、白介素．1D、肿瘤坏死因子、胰岛素受体底物．1 酪氨酸磷酸化、胰岛素受体底物．2的表达；采用免疫组织荧光方法，测大鼠卵巢 组织核转录因子核转位情况；采用反转录聚合酶链式反应和免疫印迹的方法检测 大鼠卵巢组织的还原型烟酰胺腺瞟呤二核苷酸磷酸氧化酶p22phox亚基、氧化型 低密度脂蛋白、Toll样受体一4的基因和蛋白表达。结果实验结果表明槲皮素不仅 可以降fk乇PCOS胰岛素抵抗模型组大鼠的血胰岛素，还能减少核转录因子核转位， 降低白介素一6、白介素．1B、肿瘤坏死因子炎性因子水平，对还原型烟酰胺腺嘌 大会发言 呤二核苷酸磷酸氧化酶p22phox亚基、氧化型低密度脂蛋白、Toll样受体-4的基因 和蛋白表达有抑制作用；可以升高胰岛素受体底物．1酪氨酸磷酸化、胰岛素受体 底物．2的基因和蛋白表达。大鼠性周期恢复率58．33％。结论TLR／NF．r．B信号通 路参与多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的形成；槲皮素治疗多囊卵巢综合征胰岛素抵 抗有较好的疗效：其机制可能是通过抑制TLR／NF．1CB信号通路，改善多囊卵巢 胰岛素抵抗微环境炎症，从而逆转胰岛素抵抗；槲皮素是一个潜在的，对胰岛素 抵抗有较好治疗效果的药物。 关键词多囊卵巢综合征，槲皮素，炎症微环境，胰岛素抵抗，TLR／NF-r．B 信号通路 ovary 多囊卵巢综合征 Polycysticsyndrome，PCOS 是妇科常见病，属内分泌、 代谢紊乱性疾病。近期研究发现，PCOS亦是一种慢性炎症性疾病[I】。因该病病 因病理复杂，缺少理想的治疗方法，故探讨PCOS的有效治疗方法变得尤为重要。 导师自2000年始开展Yvcos临床和实验的系列研究，采用补。肾活血祛痰方治疗 PCOS，有较多的工作积累，临床和实验结果提示，补肾活血祛痰方有改善胰岛 素抵抗的作用。槲皮素是补肾活血祛痰方中山楂内的一种黄酮类化合物，生物活 性广泛，有较强的抗氧化、抗炎作用。为进一步明确慢性炎症在PCOS胰岛素抵 抗发病中的作用，及抗炎治疗对改善PCOS胰岛素抵抗的效果及相关机制，课题 拟从炎症微环境角度，探讨槲皮素治疗胰岛素抵抗的作用及作用机制，从而为多 囊卵巢综合征临床治疗提供新的思路和方法。 一、实验材料 一 实验动物 供，第二军医大学海医系动物中心饲养。常规大鼠颗粒饲料喂养，大鼠自由摄食 12小时黑暗 18：00．6：00 周期交替进行。 二 实验试剂 脱氢表雄酮、槲皮素均购自美国Sigma公司，二甲双胍购白上海紫一试剂厂， 胰岛素试剂盒购自美国LINCOResearch公司，亚甲蓝购自江苏济川制药有限公 司，睾酮试剂盒购自美国LINCO 司，兔抗鼠IL．6多克隆抗体、兔抗鼠TNFa多克隆抗体、兔抗鼠IL．1B多克隆抗 体均购自美国Labvision--NeoMarkers公司。 -- 实验仪器 9B 大会发言 型，血糖仪购自瑞士瑞特公司，低温离心机购自美国ThermoScientific公司，实时 定量荧光PCR仪购自美国ABI公司，WB电泳设备购自伯乐公司。 二、实验方法 一 随机分组 按随机数目表法，将132只21日龄雌。眭Wistar大鼠分为病理模型组 120只 和正常对照组 12只 。 二 模型制各 分组当日，病理模型组大鼠颈背部皮下注射溶于注射用芝麻油的脱氢表雄酮 皮下注射注射用芝麻油0．2ml。连续注射共20天后，通过亚甲蓝染色方法，观察 大鼠阴道脱落细胞学变化。阴道上皮细胞持续10天为角化状态的