HLA抗体分析流式细胞技术.pdfVIP

广 　州 　医 　药 　2004 年第 35 卷第 5 期 ·1 · ·医学前沿· HLA 抗体分析的流式细胞技术 易 　燕 　肖露露 ( ) 广州器官移植配型中心 广州 　510095 　　21 世纪被称为“器官移植的时代”, 器官移植已经成 (Antihuman globulinaugmented complementdependent cytotoxici 为重要组织脏器功能衰竭的根治措施 , 但排斥反应的发生 ty , AHGCDC) , 提高了 HLA 抗体识别的灵敏度[3 ] , 但是 , 严重影响了移植物功能和存活率 , 因此预防和减少排斥反 AHGCDC 实验中孵育和洗涤的步骤延长了反应时间。有的 应一直是器官移植领域中的研究热点。2003 年 , Terasaki 教 HLA 实验室因标化 AHG 有困难或者为了避免复杂的实验操 授在“器官移植体液免疫学说”中阐明 , 移植排斥是由体 作 , 采取延长 NIHCDC 的孵育时间或提高孵育温度的方 液免疫介导的 , 抗HLA 抗体可立即或缓慢地杀死移植物而 法 , 也可增加实验的灵敏度。 引起超急性、加速、急性和慢性排斥反应 , HLA 抗体分析 1983 年 Garovoy 首次提出了流式细胞交叉配型 ( Flow 方法是移植前预测排斥反应和移植后预示移植物丧失的重 ) cytometry crossmatch , FCXM 技术 , 以 FITC 标记的抗IgG 抗 要免疫学依据[1 ] 。HLA 抗体检测方法的研究经历了近 40 年 体检测供者特异性 HLA 抗体结合于供者淋巴细胞上的情 ( [4 ] 历程 , 期间召开了 13 届 HLA 国际专题讨论会 international 况 。80 年代至 90 年代中期许多欧美的 HLA 实验室开展 workshop) 不断创新和推进试验技术的发展 , 20 世纪 70 年 了对 FCXM 的研究。1988 年Lazda 等对 38 例尸肾移植 FCXM 代血清学技术被应用于 HLA 抗体分析 , 90 年代酶联免疫吸 的回顾性分析 , 发现 FCXM 阳性患者中有 35 %未发生急性 ( ) 附试验 enzymelinked immunoadsorbent assay , ELISA 技术迅 排斥反应 , FCXM 阳性组和阴性组的移植效果无统计学差 速发展 , 并实现了对淋巴细胞抗原的提纯 , 使得 HLA 抗体 异 ; 他们认为这些 FCXM 阳性是非特异性的 , FCXM 检出的 分析的 ELISA 方法被推荐。 IgG类抗体中包括了抗HLA 抗体和非 HLA 抗体[5 ] 。1996 年 流式细胞仪是一种先进的多参数分析仪器 , 利用标记 Maarten 等对 114 例接受 CDC 阴性供体的肾移植受者进行回 荧光素的抗体在通过激光束时各个角度的光散射区分分子 顾性 FCXM 研究 , 发现 FCXM 阳性受者的急性排斥发生率 的大小和抗原特异性 , 可定性或定量分析细胞表面或细胞 为 53 % ( 8/ 15) ,