中药方剂化学成分液质联用分析中标准质谱库的建立与应用.pdfVIP

第38卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 第 11期 2010年 11月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 1588—1592 DOI：10．3724／SP．J．1096．2010．01588 中药方剂化学成分液质联用分析 中标准质谱库的建立和应用 朱振华 尚尔鑫 段金廒 钱大玮 唐于平 (南京中医药大学江苏省方剂研究重点实验室，南京 210046) 摘 要 利用电喷雾离子化四级杆飞行时间串联质谱 (ESI—Q—TOF)技术，以四物汤类方为例 ，建立了类方成 分的液质联用分析质谱库。利用 Masslynx工作站的Chromalynx模块的检索和与质谱库比较的功能，可以快 速鉴定色谱图中各个色谱峰。此方法可应用于液质联用检测系统的谱库检测，提高了对类方成分鉴定的效率 和可靠性。本质谱库共收录了液质联用条件下 57个四物汤类方标准品的质谱信息，包括正负离子模式下各 成分的保留时间、准分子离子峰及其碎片离子的精确质量数。该质谱库支持标准NIST谱图检索及比对方法， 可 自动完成总离子流色谱图中各色谱峰的识别、质谱图提取及鉴定。 关键词 电喷雾离子化四级杆飞行时间串联质谱；方剂类方；质谱库 1 引 言 中药方剂中成分复杂，定性分析方剂中主要成分是一项复杂且耗时的工作。 目前，中药成分的分析 方法主要有薄层色谱法 (TLC)、气相色谱法 (GC)、高效液相色谱法 (HPLC)等。GC和HPLC主要依据 保留时间进行定性分析，但对同一色谱柱，多种化合物的保留时间可能是相 同的，在没有标准样品时很 难对其定性分析。质谱法(MS)可以提供各种化合物的分子量、结构碎片等信息，是鉴定有机物的有力 工具。色谱法与质谱法联用，极大地提高了分离与分析能力。 目前，色谱．质谱联用技术在中药方剂中的应用 日渐增多_lJ。其中，气相色谱．质谱法(GC-MS)应用 较早，因为它们不存在接 口的问题 。且 目前 已有成熟的商品化质谱库，如 NIST(Nationalinstituteof standardsandtechnology)发行的标准质谱库，已广泛应用于环境 J、食品 、材料 等领域。液相色谱一 质谱法 (LC．MS)由于存在接 口的问题，直到 ESI接 口的出现才开始广泛应用。在 中药成分分析 中， su等 利用超高效液相．质谱串联技术分析了少腹逐瘀汤活性成分 以及在大 鼠血浆 中代谢产物，侯鹏 飞等 6利用LC．MS分析了延胡索中生物碱类成分。通过得到未知化合物的精确分子离子峰，碎片峰， 对化合物进行准确的定性分析。目前，还没有通用的、成熟的、商品化的LC．MS的质谱库可用于图谱检 索。在方剂物质基础研究中，由于化学成分复杂多样 ，化学对照品相对缺少，快速定性分析存在困难。 类方是在临床实践的历史发展中、在基本方基础上根据辨证原则产生的一系列加减衍化而形成的系列 模式 ]。类方的化学成分更为复杂，建立一个质谱库将大大提高科研效率。本实验室基于Masslynx质 谱工作站，建立了四物汤类方化学成分ESI—Q．TOF标准质谱库，应用于四物汤类方成分的快速定性与定 量分析，显著提高了类方化学成分定性分析的效率和准确度。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 ACQUITYUPLC超高效液相色谱系统 (包含二元高压泵 ，自动进样器 ，柱温箱，二极管阵列检测 器)；SYNAPT质谱系统和Masslynx4．1质谱工作站 (美 国Waters公司)。桃叶珊瑚苷、橙皮苷、芍药内 酯苷等(上海中药标准化研究中心)；野黄芩苷、黄芩素、盐酸小檗碱、盐酸药根碱、盐酸巴马汀、槲皮素 等(中国药品生物制品鉴定所)；山奈酚．3．O．葡萄糖苷(天津一方科技有限公司)；延胡索乙素、芹菜素、 四氢黄连碱、紫堇秋碱等(实验室 自制)。部分对照品的保留时间和特征离子见表 1。乙腈 (色谱纯， 2010-04-28收稿 ；2010-06-09接受 本文系国家 自然科学基金项 目(No、江苏省高校 自然科学研究计划重大基础研究项 目(No．06KJA36022)、国家教育部 “新 世纪优秀人才支持计划”(No．NCET-09-0163)、江苏高等学校优秀科技创新团队支持计划 (2009年度)资助项 目 {E-mail：dj