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几种培养基的配方.doc
41 GN增菌液成分:胰蛋白胨 20g葡萄糖 1g甘露醇 2g柠檬酸钠 5g去氧胆酸钠 0.5g磷酸氢二钾 4g磷酸二氢钾 1.5g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH7.0制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH。分装每瓶225mL,115高压灭菌15min。
42 肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨1 10g葡萄糖 5g牛胆盐 20g磷酸氢二钠 8g磷酸二氢钾 2g煌绿 0.015g蒸馏水 1000mLpH7.2制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH。分装每瓶30mL,115高压灭菌15min。
43 亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨 10g牛肉膏 5g葡萄糖 5g硫酸亚铁 0.3g磷酸氢二钠 4g煌绿 0.025g柠檬酸铋铵 2g亚硫酸钠 6g琼脂 18~20g蒸馏水 1000mLpH7.5制法:1 将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。2 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。3 将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至804 将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀。冷至50~55,倾注平皿。注:此培养基不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热。以免降低其选择性。应在临用前一天制备,贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。
44 DHL琼脂成分:蛋白胨 20g牛肉膏 3g乳糖 10g蔗糖 10g去氧胆酸钠 1g硫代硫酸钠 2.3g柠檬酸钠 1g柠檬酸铁铵 1g中性红 0.03g琼脂 18~20g蒸馏水 1000mLpH7.3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中,校正pH。 再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50~55,倾注平板。
45 HE琼脂成分:脙胨 12g牛肉膏 3g乳糖 12g蔗糖 12g水杨素 2g胆盐 20g氯化钠 5g琼脂 18~20g蒸馏水 1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液 16mLAndrade指示剂 20mL甲液 20mL乙液 20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600mL蒸馏水内,加热溶解。加入 甲液和乙液于基础液内,校正pH。再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50~55,倾注平板。 注:此培养基不可高压灭菌。甲液的配制硫代硫酸钠 34g柠檬酸铁铵 4g蒸馏水 100mL乙液的配制去氧胆酸钠 10g蒸馏水 100mLAndrade指示剂酸性复红 0.5g1mol/L氢氧化钠溶液 16mL蒸馏水 100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1~2mL。
46 SS琼脂基础培养基:牛肉膏 5g眎胨 5g三号胆盐 3.5g琼脂 17g蒸馏水 1000mL 再将两液混合,121高压灭菌15min,保存备用。完全培养基:基础培养基 100mL乳糖 10g柠檬酸钠 8.5g硫代硫酸钠 8.5g10%柠檬酸铁溶液 10mL1%中性红溶液 2.5mL0.1%煌绿溶液 0.33mL加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板。 注:制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用。煌绿溶液配好后应在10d以内使用。可以购用SS琼脂的干燥培养基。47 WS琼脂成分:胨 12g牛肉膏 3g氯化钠 5g乳糖 12g蔗糖 12g十二烷基硫酸钠 2g琼脂 15gAndrade指示剂 20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液 16mL甲液 20mL蒸馏水 1000mLpH7.0制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色。 注:供沙门氏菌分离用。Andrade指示剂和甲液的配制均见HE琼脂。
48 麦康凯琼脂成分:蛋白胨 17g眎胨 3g猪胆盐(或牛,羊胆盐) 5g氯化钠 5g琼脂 17g蒸馏水 1000mL乳糖 10g0.01%结晶紫水溶液 10mL0.5%中性红水溶液 5mL制法:1 将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2。将琼脂加入600mL加热溶解。将两液合并,分装于烧瓶内,121高压灭菌15min备用。2 临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50~55时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板。注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。
49 伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨 10
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