核盘菌(Sclerotinia+sclerotiorum)衰退相关病毒(SsDRV)和寄主分子互作初步研究.pdfVIP

中国植物病理学会2004年学术年会论文集 核盘菌(Sclerotinia (SsDRV)与寄主分子互作初步研究+ Between onInteractionSclerofiniasclerotiorum PrimaryStudy ItsHost DebilitationAssociated and Mycovirus onMolecularLevel 李华“2，付艳平1，姜道宏“2”，李国庆。2，易先宏1 30070；2华中农业大学农业微生物学国家重点 (1华中农业大学植物科学技术学院，武汉4 实验室，武汉430070) sclerotJorum)是重要的植物病原真菌，由其引起的作物菌核 核盘菌(Sciorotinia 病在我国严重为害油菜和向日葵等重要经济作物。我们在前期研究中自佳木斯市发病茄子 植株上分离获得一株衰退菌株Ep—lPN，该菌株具有不正常的生长速度，菌落形态和致病力 等(李国庆等，1996)。Ep一1PN菌株的衰退特性可以通过菌丝融合的方式传递给健康菌株 et eta1．，1999)。 al，1998)，并自其中分离到与衰退相关的dsRNA片段(Li (Jiang 有关dsRNA或真菌病毒与毒力等衰退相关的现象已在多种病原真菌中有报道，并认为可以 用来防治植物病害，如乖j用传染性弱毒力菌株可以成功防治板栗疫病(Cryphonectrfa 径。另。一方面研究弱毒相关病毒与寄主互作可以用来揭示植物病原真菌的致病机理，Nuss 及其研究组对引起板栗疫病病菌毒力衰退的弱毒病毒(Hypovirus)作了详细的研究，并利 用该病毒从分子水平上探讨了病菌的致病机理。我们研究组对来自Ep一1PN菌株的dsRNA片 sclerotiorumdebilitation 的真菌病毒，并命名为核盘菌衰退相关病毒(Sclerotinia associated 作，获得～些影响核盘菌生长和致病相关的信息。 菌株的子囊孢子单孢分离物，具正常核盘菌的表型，不含有SsDRV(RT—PCR检测)。以Ep一1PN _i二述目标噬菌体经过切割后，转化为质粒。对各个质粒中插入的cDNh片段大小进行鉴定 隆自5，端进行测序，并利用DNAM删等软件对序列进行分析，推定所编码的阅读框架及其 ‘国家自然科学基金和霍荚东教育基金会高等院校青年教师基金(80125)资助。 ”通讯作者．E-mail：daohongjiang@mail．hzau．edu．cn。 分子生物学 源分析(BLAST)。结果发现j1个克隆与植物病原真菌的致病作用均相关，3个克隆编码推 定的草酸乙酰脱氢酶(oxaloacetate acetylhydrolase)，该酶受抑制将影响到草酸的合成， 草酸是核盘菌的重要致病因子，这些基因在核盘菌致病过程中的作用有待于进1步鉴定， 有6个克隆与真菌分裂、菌丝生长等相关，Ep一1PN菌株生长缓慢及菌丝顶端不正常分枝可 能与这些基冈被抑制有关：另外在克隆中还发现与转录冈子、信号传导、热激蛋白、蛋白 质和氨基酸合成、能量转换与代谢等相关的基因。 功能的酶类可来自生物自身，也可来自分子寄生物，如RNA病毒。另一一方面外源性RdRp可 能会诱发寄主发生RNA干扰现象。我们将依据RNA干扰的机理验证上述基因(特别是与生 长和致病相关基因)的功能，并解析SsDRV影响寄主生长和致病的关键因子。 PVY”HC—Pro基因的克隆及在大肠杆菌中的表达 of ofPVYNand