流动注射电化学发光分析法测定土霉素.pdfVIP

第 31卷 第 4期 辽宁师范大学学报 (自然科学版) VO1．31 NO．4 2008年 l2月 JournalofLiaoningNorma1University (NaturalScienceEdition) Dec． 2008 文章编 号 ：i000—1735(2008)04—0457—03 流动注射电化学发光分析法测定土霉素 赵常志， 陶晟辰 ， 李 莹， 李明华 (生态化工教育部重点实验室 ，青岛科技大学 化学与分子工程学 院，山东 青岛 266042) 摘 要 ：基于土霉素在铂电极上增强三联吡啶合钌ERu(bpy)~。]‘的电化学发光信号，并结合流动注射分析技术，建立 了1种测定土霉素的电化学发光分析新方法．在含有5．0×10 mol／LRu(bpy)i 的pH=8．0磷酸盐缓冲溶液中，采 用 1．15V 的应用 电位和 2．0mL／min的流速 ，测定土霉素的检出限为 1．30mg／L(S／N=3)，线性范 围为 2．50～ 25． 0mg／L，相对标准偏差小于 1．50 (n一9)，加标 回收率为 97．4 ～104 ．该法简单 、快速、灵敏 ，现已成功地用于药物 制剂中士霉素含量的测定． 关键词 ：电化学发光；土霉素 ；流动注射分析 ；三联吡啶合钌 中图分类号 ：0657．3 文献标识码 ：A 土霉素 (Oxytetracycline，OTC)的化学名称为 6一甲基一4一(-- 甲氨基)一3，5，6，10，12，12a一六羟基一l，11一二氧代一1，4，4a， 5，5a，6，11，12a一八氢一2一并四苯 甲酰胺，又称氧 四环素[OTC，(CH。)2NR]，属于四环素类抗生素，其化学结构式见图 1． 土霉素可作为预防和治疗畜禽疾病的兽药，或作为促进畜禽生 长 的饲料添加剂而应用于可食性动物 中，在水产养殖业 中用于治疗 多种鱼类疾病 ；在乳业 中用于提高奶牛产奶量 ；在养蜂业 中用于预防 NH2 蜜蜂的感染性疾病．但过量使用不可避免使母体、代谢产物等相关抗 生素残留于动物的肌肉、蛋、奶 、脏器组织中，影响人体健康．鉴于抗 生素的作用与危害并存 ，动物性食 品中四环素族抗生素的残 留问题 受到关注 ，各 国为此制定 了动物源性食 品中兽药最高残 留标准和检 CH3 测方法．目前 ，我国测定土霉素制剂 的药典方法是 HPLC法 1【]．对于 微量土霉素的测定，常用 的方法有紫外分光光度法[2]、电化学分析 图1 土霉素 的化学结构 法 、荧光法 和细菌抑制法[等．电化学发光(ECL)分析法保留了传统化学发光分析法所具有的灵敏度高、线性范围 宽、仪器简单等以外，还具有反应过程容易控制、一般不需要分离，可直接测定的优点 ．由于土霉素分子中含有叔胺， 在一定条件下与三联毗啶合钌[Ru(bpy)。。]反应可以产生显著的ECL．基于这种增强 ECL的作用和 尚未见到电化学发 光分析法测定土霉素的报道 ，我们建立 了1种检测土霉素的ECL分析法 ，并将其用于药品中土霉素含量 的测定． 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 CMFIA一1型流动注射分析仪 (山东电讯七厂)，MPI—B型 电化学发光分析仪 (西安瑞迈分析仪器有限公司)．流通式 电解池采用三电极系统，其中工作 电极为铂电极 ，对极为不锈钢管，参比电极为Ag／AgC1电极．实验的电化学发光流动 注射装置和流通式电解池结构如图 2和 图3所示． Ru(bpy)g’}(Sigma公司)储备液 ：1．0×10_。mol／L，称取一定量 Ru(bpy)~ 用去离子水溶解后 ，于棕色瓶中4℃避 光保存．土霉素储备液 ：准确称取土霉素对照品(中国药品生物制品检定所)30mg，准确加人 50．0mL去离子水，其质量 浓度为 1．0×10～ g／mL，于冰箱 中冷藏保存 ，稀浓度 的土霉素标准溶液由此储备液逐级稀释．取土霉素药片(山东金洋 药业有限公司)10片仔细研磨，准确称取一定量用流动相稀释成合适浓度．流动相为pH=8．0的磷酸盐 (PBS)缓冲溶 液．其他所用试剂均为分析纯，实验用去离子水取 白艾柯牌超纯水机，