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流式细胞术在海洋浮游植物研究中的应用 ΑΠΠΛΙΧΑΤΙΟΝΣ ΟΦ ΦΛΟΩ ΧΨΤΟΜΕΤΡΨ ΦΧΜ ΙΝ ΜΑΡΙΝΕ ΠΗΨΤΟΠΛΑΝΚΤΟΝΡΕΣΕΑΡΧΗ 王 斌 薛玮珏 华东师范大学河口海岸国家重点实验室上海 华东师范大学生物系上海 α 传统的海洋浮游植物研究已经积累了许多形态 圆形光斑 被测细胞通过光斑时受到激发 发射出 ∀ 学与分类学知识 但是对其生态学 以及微型浮游植 种激发荧光 包括绿荧光 红橙荧光和红荧光 同时还 ∀ ! 物的研究≈则由于技术限制而有所不足∀ 年代中 产生不同方向的光散射主要是正前方的前角散射和 期以来国际上已开始把流式细胞术ƒ ≤2 侧面的侧向散射∀ 上述光信号分别被各自的光电二极 应用于海洋浮游植物研究 很大程度地弥 管或光电倍增管探测到经信号处理系统放大并转换 ƒ≤ ≈ 数字信号 在仪器配置的电子计算机上处理 计算机 补了传统浮游植物研究方法的种种不足 ∀ 流式细胞 ∀ 术首先应用在细胞生物学及医学等领域∀ 它集中了现 同时对仪器状态设置及监控并对测定数据进行单参 代流体力学 激光光学 精密机械电子及电子计算机 数或多参数的定性及定量分析以图形显示或打印输 ! ! 等多种先进技术可以对各种生物细胞群体进行快 出∀ ≈ 速 实时及多参数测定 本文简要介绍了流式细胞 ! ∀ 术的原理及测定方法及其在海洋浮游植物研究中的 应用及进展∀ 流式细胞术测定的方法与原理 采样及样品测定方法 用于测定的浮游植物样品的采集方法与一般海 洋生物学研究中的方法基本相同因为流式细胞术测 定的生物细胞必须处于单细胞悬浮液状态所以单细 图 流式细胞仪液流系统 胞的海洋浮游植物样品可以直接进行测定也可经液 氮冷冻保藏后测定采集的水样须用滤膜过滤并避光 流式细胞术对海洋浮游植物测定的原理 保存以确保荧光的暗吸收∀ 流式细胞仪本身还须用标 准荧光微球进行校准∀ 测定时对仪器需设定合适的测 概述 海水中的颗粒物质包括悬浮的泥沙 有机碎屑颗 定阈值 参数组合及放大模式 从而获得所需的特定 ! ! 粒 浮游植物和浮游动物等 这些物质表面及内部结 信息 测定所得数据都是相对值 只能用于相对大小 ! ∀ 比较 如想得到测定样品的绝对数值 必须通过测定 构中性质不同的生物化学物质在激光的激发下会产 标准荧光微球或制作标准曲线再换算出绝对值∀