HSPC300异常表达对肺鳞癌转移潜能影响地研究.pdfVIP

HSPC300异常表达对肺鳞癌转移潜能影响的研究 蔡雄伟 郭素萍 韩延珺 邸雪冰 高燕宁 程书钧 张开泰 中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院肿瘤研究所 分子肿瘤学国家重点实验室病因及癌变研究室 北京 100021 摘要；背景：HSPC300(haematopoieticstem/progenitorcellprotein300)在植物学研究中被报道参与肌动蛋白的组 装以及细胞运动，然而它与人类肿瘤的关系尚不清楚。结果：107例组织芯片的免疫组化结果提示，HSPC300在肺 鳞癌肿瘤组织中的阳性率为84.1％，显著高于癌旁组织(30.8％)。HSPC300的表达水平与是否有淋巴结转移以及肿 瘤临床分期相关.在肺癌细胞系中，HSPC300基因沉默导致细胞伪足减少，细胞体外侵袭能力下降。HSPC300与 WAVE2在肿瘤细胞中形成复合物，HSPC300的表达沉默可导致WAVE2降解。此外在具有淋巴结转移的原发肿瘤组 织中，HSPC300与WAVE2蛋白的共表达率为87.5％。 结论:HSPC300的异常表达与肺鳞癌转移潜能的获得相关， 它与WAVE2蛋白的相互作用影响肿瘤细胞的迁移能力。 关键词：肿瘤学;HSPC300;转移潜能;肺鳞癌;WAVE2 H2170：肺鳞癌细胞系，源自ATCC。 PG：肺大细胞癌患者胸水中培养成活的癌细胞系，由中国人民解放军总医院建立3。 2．3免疫组化 Cruz， SaIlta Cmz’CA，USA)。每例标本由两名病理医生独立阅片。来源于同一组织样本的两张切片中，如 果HsPC300与WAⅦ2同时为阳性，视作共表达。 2．4基因表达干扰 UAUGUCUUGUCGUUC HSPC300的si鼬、『A序列为：No．1：5’-CGA AdTd■3。；No．2：5’-AAC UAGAGU CAACACUAAACG GGAGAA ACAUdTd■3’：No．3：5’·UUG CUC s淑NA序列为：5·．GCAUG～AGC 沉默效果由Westembl傩沁g检测。 2．5细胞体外迁移能力观察 FL 产品说明书进行。丝状肌动蛋白染色用BODmY 性的判断参照文献。扫描电镜观察等实验均参照《细胞试验指南》。 2．6免疫共沉淀 Louis，MO，USA)和w怂，E2抗体(SantaCruz’USA)做免疫共沉淀实验。兔疫荧光技术用于鉴定 HSPC300与wAVE2在细胞中共定位。 2．7统计学分析 3实验结果 3．1HSPC300在肺癌组织中的表达 肿瘤的分化程度无关，但与临床分期相关。 3．2HSPC300基因沉默导致肺癌细胞的侵袭性以及形态学上的改变 体外侵袭实验表明，HsPc300经siI心IA干扰后表达明显下调，其侵袭能力也显著下降。在形态 上，HSPC300的表达水平被抑制后，细胞去极化，伪足大量减少。 3．3肺癌细胞中HSPC300与W州E2的相互作用 在细胞中发生共定位。免疫共沉淀实验证实两者形成复合物。同时，免疫组化也表明HSPc300与 85．7％，而在无淋巴结转移的肿瘤组织中为52．9％，两者具有显著差异。 3．4HSPC300与W州E2蛋白的稳定性及活性相关 沉默的细胞是相似的。 4讨论 在我们的研究中，免疫组织化学染色分析发现HSPC300蛋白在肺鳞癌患者的肿瘤组织中表达频 数显著升高，且与淋巴结转移、临床分期存在显著的相关性。我们着重研究了该蛋白与肺鳞癌的肿 显著抑制细胞迁移／浸润的能力。HSPC300蛋白与wA、悒2存在直接相互作用，前者主要通过影响 WA、悒2的相互作用，进而影响细胞骨架来实现对肿瘤转移的作用。 参考文献(略) 55