-%2731-P核磁共振在肿瘤细胞代谢的研究中的应用.pdfVIP

第21卷增刊 舟析试验室 V01．22 Suppl 2003年11月 Clfinese of Journal Laboratory． 2003一ll Analysis 31 P核磁共振在肿瘤细胞代谢研究中的应用 黄荣清+，骆传环 (军事医学科学院放射医学研究所，北京100850) 摘 要：综述”PNMR在肿瘤细胞代谢研究中的应用。通过细胞的灌流装置， 用31P NMR测定细胞内含磷化合物、pH等的变化，对肿瘤细胞代谢进行分析：31P NMR能动态地一次同时监测活细胞内多种含磷代谢物及pH变化，较好地应用 于肿瘤细胞的能量代谢和磷脂代谢等研究中031PNMR具有无损伤性，克服了许 多分析方法的提取分离步骤，具有独特的优点。 关键词：31P核磁共振；肿瘤细胞；代谢 从1946年发现核磁共振(NMR)现象以来，控制细胞外部的环境。现已出现很多能固定细胞 NMR多用于物理研究和化学分析。70年代由于超的灌流装置’2’5J，它们各有其优缺点。目前常用的 导磁体、快速付立叶变换和计算机技术的迅速发 灌流装置是将细胞与液态的低熔点琼脂糖混合均 展，使NMR在生物学上得到广泛应用。1973年 Moon和Richards用31PNMR法测定了红细胞中的 ／l membrane 下在基层膜胶线(basement pH值J』，从此NMR技术在细胞生物学研究中得到 gel 了较大发展。目前，NMR研究细胞用得最多的是31增殖到高密熙引，然后装入核磁样品管，连接灌流 PNMR，这主要是因其灵敏度较高，共振谱线简单 装置，用细胞培养液等进行灌流。在灌流过程中可 明了，许多重要的含磷代谢物在细胞中有较高浓 通95％O：：5％C02的混合气体或加人药物等。 度。和其它分析方法相比，NMR技术具有非破坏 2肿瘤细胞31P NMR谱的特点 P 性(nondestructive)和无损伤性(noninvasive)，它能无细胞的31 损伤地监测细胞内很多有机和无机化合物的浓度 P 及变化。31 NMR现在多用于肿瘤细胞的研究，它 是从分子水平上研究细胞代谢的，细胞与离体器 官、活体动物的31PNMR已成为非损伤地研究生物 样品的有效方法。 l技术方法 为了获得较好的NMR信号，需要细胞密度很 高的细胞悬液(108个细胞／1mL或更大)，这给 NMR研究活细胞带来了困难，因为如此高密度的 细胞悬液在31P NMR观测中会出现缺氧、营养缺 乏、代谢产物蓄积甚至细胞死亡，从而难以观察到 活细胞正常生理状态下的代谢变化。为了解决这 个问题，有效的办法就是在模拟生理条件下对细胞 因为活细胞的共振峰宽，一般在谱图中较难区分 进行连续灌流。其优点是使同种细胞能在高磁场 册和其它三磷酸核苷。在一18．5 的NMR谱议中连续观测数小时甚至数天而同时能 ·-·——4·--—— 第22卷增刊 分析试验室 V01．22