高效液相色谱法测定冷冻饮品中的三聚氰胺.pdfVIP

技术论文 rand B 高效液相色谱法测定 冷冻饮品中的三聚氰胺 □王群 袁迪 三聚氰胺（C N H ）是一种氮环有机化工原料，具有 柱检测三聚氰胺时，所需流动相组成复杂，而且由于流 3 6 6 肾毒性。三聚氰胺分子中含有大量氮元素，而普通的凯 动相中添加了离子对试剂，需要3h ～5h 平衡时间，仪器 氏定氮法测定奶粉及食品中的蛋白质含量时无法区分 才能达到稳定状态。实验选用强阳离子交换柱进行检 氮元素来源于蛋白质还是三聚氰胺的氮杂环，因而一些 测，容易平衡，且分离效果良好，灵敏度高。在流动相选 厂商为了降低成本而添加这种化工原料，以提高产品中 择时，考察了乙腈比例对色谱分离的影响。试验发现，三 蛋白质含量检测值。长期或反复大量摄入三聚氰胺可能 聚氰胺对流动相中乙腈比例变化不敏感，乙腈比例有 损害肾与膀胱，产生结石。冷冻饮品是一种人们经常食 20%变化至40%，三聚氰胺保留时间在4.6min ～4.8min 用的食品，检测其三聚氰胺含量对于保障安全食用具有 之间，在此条件下，实验所测样品均能有效分离，且在乙 重要意义。 腈为30%时分离最好。 实验部分 （2）提取条件的选择 提取样品时，考察了磺基水 （1）主要仪器与试剂 高效液相色谱仪、高速离心 杨酸溶液、亚铁氰化钾和乙酸锌溶液沉淀蛋白的效果， 机、数控超声波清洗器、旋涡混合器、 乙酸锌溶液： 发现磺基水杨酸溶液沉淀的提取液，在三聚氰胺处有明 219g/ L ，称取219g 加入 3.0mL 乙酸，加水溶解，定容至 显干扰峰，不能有效分离；亚铁氰化钾和乙酸锌溶液沉 1000mL；亚铁氰化钾溶液：106g/ L，称取 106g 亚铁氰化 淀的提取液，在三聚氰胺处没有干扰，而且随着亚铁氰 钾加水溶解后，定容至 1000mL；磷酸二氢钾溶液： 化钾和乙酸锌溶液用量的增加，沉淀效果更好，基线平 0.05mol/ L ，称取6.8g （准确至0.01g）磷酸二氢钾，加水 稳，但亚铁氰化钾和乙酸锌溶液用量增加，对三聚氰胺 800mL 完全溶解后用磷酸调节 Ph=3.0 ，用水稀释至 回收率有较大影响。试验证明，使用 1mL 亚铁氰化钾和 1000mL；盐酸溶液：0.1mol/ L ，移取4.1mL 浓盐酸于 1mL 乙酸锌，既可有效沉淀又有较高回收率。 500mL 容量瓶中，用水稀释定容至刻度；乙腈：色谱纯； （3）线性范围与检出限 将三聚氰胺标准储备液 三聚氰胺标准贮备溶液：1.0mg/ mL，称取0.1g （准确至 用盐酸溶液稀释成浓度为 0.1 、0.2 、0.5 、0.8 、1.0、2.0 、 0.0001g）三聚氰胺标准品用体积比为1 ：1 的乙腈- 水 5.0μg/ mL 的标准使用溶液，在选定的色谱条件下进 溶液溶解后定容于 100mL 容量瓶中，于4 ℃冰箱中保 行检测分析，以峰面积 A 对浓度 c 绘制标准工作曲 存。使用时，用盐酸溶液稀释成所需浓度的标准使用 线。结果表明，以进样量20μL 计，在三聚氰胺浓度为 液；实验用水为超纯水。 0.1μg/ mL ～5μg/ mL 范围内，峰面积与浓度呈良好的 （2）色谱条件 色谱柱：强阳离子交换色谱柱，SCX ， 线性关系，线性回归方程：A=62.862c+0.6863 ，线性相 250mm ×4.6mm ，5μm ；流动相：磷酸二氢钾溶液- 乙腈， 关系数r=0.9999 。以10 倍信噪比计算得方法检出限为 体积比为70 ：30 ；流速：1.0mL/ min；柱温：30℃；检测波长： 0.08μg/ mL(2.0mg/ kg) 。 240nm ；进样量：20μL。 （4）精密度与回收试验 将加标量不同的样品应用 （