秦川牛BMP8B基因遗传变异研究的论文.pdfVIP

遗传育种与繁殖 秦川牛BMP8B基因遗传变异研究 曹修凯1，陈宏。1,2 l西北农林科技大学动物科技学院，杨陵中国712100 2国家肉牛改良中心，杨陵中国712100 摘要：骨形态发生蛋白8B是一种信号传导分子，它在骨代谢、调节机体产热及维持机体能量平衡方面起着重 要作用，说明BMP8B可以作为调节生长发育的候选基因。为了探究BMP8B对生长发育的影响，本试验首先利 PCR．RFLP技术对每头秦川牛进行分型，并与4个生 g．2639TC，g．2900CG和g．10817CT))。然后利用forced 长性状(体重、体长、胸围、坐骨端宽)进行关联。结果显示，SNPl，2，和3对生长性状有显著影响(P0．05)， 6个组合单倍型间也存在显著差异(P0．05)。结果表明，BMP8B基因参与了秦川牛生产发育的调节，同时3个 SNP可以作为秦川牛早期标记辅助选择的遗传标记。 关键词：BMP8B基因，秦川牛，组合单倍型，生长性状 1引言 BMP是一种多功能的生长因子，属于转录生长因子p超家族(TGF．p)。BMP的生物功能是 由于它能诱导异位骨的再生而被发现的【11．到目前为止，BMP家族已有30多个成员，占了TGF．B 超家族的近1／3[2】。虽然这些分泌型蛋白分子是因为它们成骨作用而被命名为骨形态发生蛋白， 但随着研究的不断深入，人们发现这类分子广泛地参与了机体的生理生化调节，所以BMP或许 并不能准确的描述这类分子【3，4】。 BMP8B是BMP家族的重要成员，它参与了许多生理生化调节。最近研究表明，BMP8B在 小鼠下丘脑和褐色脂肪组织高表达，并通过外周和中枢两条途径调节机体产热【5】。Whittle等发现 Bmp8b‘／-，J、鼠产热、代谢率下降，但体重增加。动物试验发现，哺乳动物褐色脂肪组织在调 节体重方面发挥重要作用【6’7，8，9]。因此，我们有理由认为BMP8B通过褐色脂肪组织间接调节体 在骨折后骨的再生中发挥重要作用【12】。BMP的其他成员，如BMP4、7，能够诱导褐色前脂肪细 胞甘油三酯的形成，同时也参与了牛生长发育的调节【4，13，14】。 本研究发现了秦川牛BMP8B基因的5个SNP，并构建6个组合单倍型，同时进行关联分析， 研究BMP8B基因对生长发育的作用，以期对肉牛育种提供基础资料。 2材料与方法 2．1试验动物及生长数据 396份血样采自陕西省秦川牛良种繁育中心，其中298头基础母牛，生长数据(2岁)由本 L。 课题组相关人员现场测定【15】。基因组DNA按照文献标准程序提取[16】，并统一稀释到50ng／la 2．2SNP扫描 laL构建DNA池【l7】。同时，根据NCBI公布的牛BMP8B基因序 将所有DNA样品各取0．5 ID：100296238)。 列设计7对引物扩增牛BMP8B基因(GenBank laL)：50 la PCR扩增反应体系(25 M的上下游引物，1×buffer(包括1．5 ng基因组DNA、0．5 mM U gMdNTPs(dATP,dTTP，dCTP,和dGTP)和O．625TaqDNA聚合酶(MBI， MgCl2)，200 502 第二届中国内牛选育改良与产业发展田际研讨会置中国畜牧兽医学会养牛学分会八届二次学术研讨会论文集 Lithuania)。 PCR反应程序：95℃预变性5rain；9412变性30s，Tm(℃)复性(表1)30s，72。C延 伸lmitt，32个循环；72℃延伸10mill，4℃保存。 表1牛BM